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(無題) 削除/引用 No.10576-4 - 2022/06/23 (木) 22:04:06 - TOKIO https://www.jneurosci.org/content/27/36/9801/tab-figures-data 蛋白の真ん中にGFPを入れた例です。光ります。

(無題) 削除/引用 No.10576-3 - 2022/06/23 (木) 03:51:45 - おお 何度かそのようなものを見たことがあります。 スプライシングでエクソンにGFPをいれてそのエクソンが取り込まれたら光るとか、、FRETでN末とC末がうまく折りたたまれたときはFRETが抑制されるとか。スプライシングアクセプターとドナーに挟まれたGFPをランダムに挿入して、ある遺伝子のCDSのエクソンの間にGFPが挿入できるようにして、特定の条件などでGFPが光る細胞をクローン化してどんな遺伝子がその条件に関わっているかを見るとか、、、 もしあなたのコンストラクトで光らないならそれはN末、C末につけたときでも起こるような原因になるかと思いますが、そういうトラブルもあまり聞いたことがないですねぇ。

(無題) 削除/引用 No.10576-2 - 2022/06/22 (水) 20:11:33 - 独り言 普通に光るので、大丈夫です。

タンパクA−GFPータンパクBは光る？ 削除/引用 No.10576-1 - 2022/06/22 (水) 19:48:13 - GFP 表題の通り、タンパク質A、GFP、タンパク質Bを融合したものを作製します。 より具体的に書くと タンパク質A-(GGS linker)x3-GFP-(GGS linker)x3 -タンパク質B という構造にする予定です。 このようにタンパク質の中央にGFPを配置した場合、 蛍光が失われる可能性はありますか？ 一般的にGFPはタンパク質の末端に配置しますよね。 タンパク質Aとタンパク質Bの構造・大きさによる！ との指摘を受けそうですが、 GGS linkerで離れているので大丈夫かなと思っています。 ご意見を頂けますと幸いです。

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