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ELISAの問題
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No.10552-TOPIC - 2022/06/16 (木) 19:10:36 - hvbjk
血中の抗体価を調べたく思いELISAをしました。したら抗原タンパク質をコートしたwellの方が何もコートしていないwellの吸光度よりも明らかに低いのですがこれはいったいどうしたもんでしょうか。抗原タンパク質が抗体ごと取れてしまったのでしょうか。ELISA用のプレートは3年くらい前に購入したものです。このプレートは吸着能において3段階のうち一番高吸着性というタイプです。購入当時に何度か使っていますがその時は問題なく使用できました。
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No.10552-2 - 2022/06/19 (日) 14:31:46 - BLOCK
Blockingが不完全で、抗原コートしているウェルは抗原がblocking作用をして非特異的シグナルを低減させているのでは?
血清では抗原非特異的なIgG/Mが非常にたくさんありますから、blockingが不完全だとアーティファクトがでますよ。
ELISAの問題
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No.10552-1 - 2022/06/16 (木) 19:10:36 - hvbjk
血中の抗体価を調べたく思いELISAをしました。したら抗原タンパク質をコートしたwellの方が何もコートしていないwellの吸光度よりも明らかに低いのですがこれはいったいどうしたもんでしょうか。抗原タンパク質が抗体ごと取れてしまったのでしょうか。ELISA用のプレートは3年くらい前に購入したものです。このプレートは吸着能において3段階のうち一番高吸着性というタイプです。購入当時に何度か使っていますがその時は問題なく使用できました。
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