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ウエスタンでECL焼けしたあとに再実験 トピック削除
No.10539-TOPIC - 2022/06/13 (月) 21:43:30 - えいじろう
ウエスタンブロットでバンドが茶色くECL焼けしたあとに再度同じ抗体で同じように実験したらバンドの濃さに影響しますか?
前と結果がやや違う気がするのですが、、、、
 
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(無題) 削除/引用
No.10539-5 - 2022/06/14 (火) 09:50:12 - おお
>[Re:4] えいじろうさんは書きました :
> 焼けた部分がダメというのはどういう意味でしょうか。
> シグナルが弱くなるという意味でしょうか。
>

経験的にその部分はシグナルがかなり弱くなります。同じ抗体でもう一度検出してもほとんどシグナルがないとか、中抜けみたいな感じになるとか。茶色くなってない部分はそんなに違和感なく検出できることがおおいです。

(無題) 削除/引用
No.10539-4 - 2022/06/14 (火) 08:02:31 - えいじろう
焼けた部分がダメというのはどういう意味でしょうか。
シグナルが弱くなるという意味でしょうか。

(無題) 削除/引用
No.10539-3 - 2022/06/14 (火) 00:37:46 - おお
焼けた部分はだめですね。

(無題) 削除/引用
No.10539-2 - 2022/06/13 (月) 22:02:47 - Y
抗原タンパク質がとんでもないレベルで過剰量存在していると思われます。そのblotを再利用してもあてになるような(半)定量的な評価は困難ですので、泳動する試料のタンパク質量を1/10以下まで減らして、改めて再実験したほうが良いかと思います。

ウエスタンでECL焼けしたあとに再実験 削除/引用
No.10539-1 - 2022/06/13 (月) 21:43:30 - えいじろう
ウエスタンブロットでバンドが茶色くECL焼けしたあとに再度同じ抗体で同じように実験したらバンドの濃さに影響しますか?
前と結果がやや違う気がするのですが、、、、

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