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(無題) 削除/引用 No.10433-5 - 2022/04/30 (土) 02:00:23 - -_- DH5aでできなかったものがDH10bでできたことはあります。

(無題) 削除/引用 No.10433-4 - 2022/04/29 (金) 23:28:47 - おお ２０k以下なら大抵の通常使われているやつでOKだと思う。 まあ強いて言うならXL10 goldだっけとかかもしれないけど。確か謳い文句的には長いゲノム断片のクローニングに向いているっていうことだったと思う。ゲノム以外のフラグメントでどうかわからないけど、これで１０kぐらいのインサート（プラスミドから切り出し）をプラスミドに入れたことはある。ほかのコンピでも多分できただろうと思います。

(無題) 削除/引用 No.10433-3 - 2022/04/29 (金) 11:33:18 - み 効果はあります。 Stblシリーズしか使ったことないけど他社品でも同等なんじゃないでしょうか。最近は37℃で使用できるものが出てきて手技的にも楽。 経験上、問題になるのは導入効率というよりむしろプラスミドがインタクトに菌体内で保持されるかだと思う。 昔はKOコンストラクト作製時にLong armだけで10kbとか普通にやっていて200コロニーピックアップして全てハズレだったものがLarge plasmidに使用すると良いとうたう商品に変えたら10個中複数当りがあったことを経験して驚いた。 プラスミドサイズだけでなくレンチウイルスとかリコンビネーションが起こりやすいプラスミドにも効果を感じる。

(無題) 削除/引用 No.10433-2 - 2022/04/29 (金) 11:13:52 - G25 electroporationが間違いないところですが、 大きなプラスミドが入りやすいとうたうコンピーテントセルがいろいろと市販されていて、購入して使ったこともありますが、あまり恩恵を感じたことがない。 効果絶大という製品があったら私も知りたい。

大きいサイズのプラスミドの形質転換 削除/引用 No.10433-1 - 2022/04/29 (金) 10:43:25 - xyz 大きいサイズ(>10kb)のプラスミドの形質転換を行おうとしているのですが、どのコンピテントセルを選択しようか迷っています。 もし似たようなことをやったことがありましたら、参考にしたいので具体例や使用感等、またおすすめなどもありましたら教えていただけると助かります。 よろしくお願いします。

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