Bio Technical フォーラム

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吸光度が目視と一致しない トピック削除
No.10292-TOPIC - 2022/02/25 (金) 16:42:32 - くも
こんにちは。いつも参考にさせてもらっています。

ELISAで450 nmをプレートリーダーで測定していますが、
目で見た色の印象と吸光度が一致しません。
発色していないように見えるウェルの方が、発色しているものより高い値になっています。

試しに、同じ液を3列と9列に入れて測定すると、9列の方が値が高く、有意差がありました。

プレートリーダーの問題でしょうか?
アドバイスをもらえたら嬉しいです。
よろしくお願いします。
 
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ありがとうございます 削除/引用
No.10292-4 - 2022/02/25 (金) 18:23:21 - くも
nonameさま

ありがとうございます。

純水で測定してみました。
最大で0.010の値の差があったのですが、
二波長測定にすると0.005に抑えられました。

ただ、プレートリーダーの電源を入れ直して、再測定すると
同じ純水ですが、値が0.020上昇していました。

試薬リザーバーの洗浄不足でのコンタミの可能性もあるかもしれないと思っています。
新品を使ってみても値の変動が改善しない場合は、メーカーにきいてみようと思います。

(無題) 削除/引用
No.10292-3 - 2022/02/25 (金) 17:11:36 - noname
列ごとに吸光の値が違うことはよくあります。
試しに全部のウェルに水を入れて差を見てみてはいかがでしょうか。
差が大きいようであればキャリブレーションをするとか。
メーカー修理が必要な場合もあります。

修正 削除/引用
No.10292-2 - 2022/02/25 (金) 16:50:27 - くも
すみません。訂正します。

同じ液を3列と9列に入れて測定すると、9列の方が低い値になりました。

吸光度が目視と一致しない 削除/引用
No.10292-1 - 2022/02/25 (金) 16:42:32 - くも
こんにちは。いつも参考にさせてもらっています。

ELISAで450 nmをプレートリーダーで測定していますが、
目で見た色の印象と吸光度が一致しません。
発色していないように見えるウェルの方が、発色しているものより高い値になっています。

試しに、同じ液を3列と9列に入れて測定すると、9列の方が値が高く、有意差がありました。

プレートリーダーの問題でしょうか?
アドバイスをもらえたら嬉しいです。
よろしくお願いします。

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