MC3T3-E1を24well plteでフルコンフルエントまで培養後、Osteoblast-Inducer Regent(Takara)を用いて分化誘導を行い、14日後にアリザリンレッドSを染色を行っています。同一well内の端のみが石灰化しており、中央部は全くといっていいほど石灰化が起こっていない(染色されていない)のですが、何か手技に問題があったと考えられますでしょうか(フルコンフルエントにしすぎている等)。
論文を数報検索するとwell中でまんべんなく染色されているものや、逆に中央部が濃く端部分が染色が薄く染色されている写真などがみられ、どのように石灰化していくのが一般的であるか分からずにおります。
ご回答いただけますと幸いです。 |
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