Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

ヒトiPS細胞のEDTA剥離 トピック削除
No.10268-TOPIC - 2022/02/19 (土) 02:01:32 - けてーん
よろしくおねがいします。
マトリクソームのプロトコルに従って、
StemFitとLaminin511E8で培養中のヒトiPS細胞を
5mM EDTA/PBSで剥がして継代しています。

殆どの株は問題なく剥がせるのですが、
1株だけどうしても接着が強すぎて剥がれない株があります。
EDTA処理時間、濃度、511E8コート条件の変更の他に
検討できる点はありますか?
皆様のご経験を聞かせていただけるとありがたいです。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.10268-3 - 2022/02/25 (金) 18:53:40 - KY
私はコロニーに格子状の傷をつけて、その一部を継代していました。

(無題) 削除/引用
No.10268-2 - 2022/02/22 (火) 09:11:12 - 匿名
CiRAで公開しているプロトコールでは、0.5x TrypLEを用いているので試してみてはいかがでしょうか?
www.cira.kyoto-u.ac.jp/j/research/img/protocol/hipsprotocolFf_140311.pdf

また、Accutaseを使用しているプロトコールもあるかと思います。

ヒトiPS細胞のEDTA剥離 削除/引用
No.10268-1 - 2022/02/19 (土) 02:01:32 - けてーん
よろしくおねがいします。
マトリクソームのプロトコルに従って、
StemFitとLaminin511E8で培養中のヒトiPS細胞を
5mM EDTA/PBSで剥がして継代しています。

殆どの株は問題なく剥がせるのですが、
1株だけどうしても接着が強すぎて剥がれない株があります。
EDTA処理時間、濃度、511E8コート条件の変更の他に
検討できる点はありますか?
皆様のご経験を聞かせていただけるとありがたいです。

3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。