Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

ダブルチミジンブロックでのS期同調 トピック削除
No.10252-TOPIC - 2022/02/14 (月) 11:31:45 - 地方国立ピペド
本日、発表会においてダブルチミジンブロックによってHeLa細胞、A549細胞、C2C12細胞をS期に同調して蛍光免疫染色した実験結果を発表したのですが、ダブルチミジンブロックによって本当にS期に同調されているか確認しましたか??という質問を受けました。
S期に同調できたかを確認する方法はありますか??
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.10252-3 - 2022/02/15 (火) 13:43:08 - bhj
S phaseのマーカーはestablishされたものがすでにいくつかあるので抗体買ってICCかFCで測定して全細胞の何%くらいがS phaseかをしべてみてください。細胞周期の同調は細胞によってはなかなか揃わなくて、うまくそろう細胞でも100%近く がSphaseになるわけではないです。数少ない経験ですがdoubue thymidine blockはそれほど優れた方法だという印象がありません。過去の論文見て全細胞のうちどのくらいの割合の細胞がS phaseであることをもって同調したとするかも検討ください。

(無題) 削除/引用
No.10252-2 - 2022/02/14 (月) 12:23:50 - s
むしろ、全く確認しないで実験していたならそのほうがびっくりなのですが。細胞株によって結構条件違いますし。

BrdUやEdUの取り込みを見るか、DNA量を見るか、その組み合わせかでしょう。fucciやそれに類する方法が使えるならそれでもいいけど。

ダブルチミジンブロックでのS期同調 削除/引用
No.10252-1 - 2022/02/14 (月) 11:31:45 - 地方国立ピペド
本日、発表会においてダブルチミジンブロックによってHeLa細胞、A549細胞、C2C12細胞をS期に同調して蛍光免疫染色した実験結果を発表したのですが、ダブルチミジンブロックによって本当にS期に同調されているか確認しましたか??という質問を受けました。
S期に同調できたかを確認する方法はありますか??

3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。