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(無題) 削除/引用 No.10248-4 - 2022/02/13 (日) 16:05:49 - TOK ちょっと待ってください。HEK293細胞を「剥がす」だけなら確かにEDTAだけで剥がれますが、FACS単細胞解析等のために単細胞化するという意味ならEDTAだけでは無理で、メカニカルに強力なピペッティングが必要です。というのはほかの接着細胞と異なり、HEK293系の細胞の横の接着はCa2+/Mg2+非依存的だからです。そのためピペッティングで単細胞化してもEDTA-PBS中で高密度で置いとくとまたどんどん凝集していきます。また、PBS-EDTA中に浮遊させた単離（したはずの）細胞を15 mlチューブで遠心すると、凝集した細胞がもやもやした塊となってチューブ壁に引っかかって底まで落ちないことがあります。ご注意を。

(無題) 削除/引用 No.10248-3 - 2022/02/12 (土) 00:34:57 - ファイト みさん ありがとうございます。 確かにキレート効果を上げるという表現はおかしいですね。 失礼しました。 なるほど、EDTA単体でも剥がせるのですね。 ありがとうございます！勉強になりました。

(無題) 削除/引用 No.10248-2 - 2022/02/12 (土) 00:05:31 - み キレート効果を上げているという表現はおかしい。 カルシュウムイオンをキレートすることでカドヘリンなどの接着分子を消化しやすくしている。 トリプシンはタンパク分解酵素 EDTAはキレート剤 293は剥がれやすい細胞だからEDTA単独でも剥がせる。 極論、mediumまたはPBSを吹きつけるだけでもある程度剥がせる。

培養細胞解離の際のEDTA単体の効果について 削除/引用 No.10248-1 - 2022/02/11 (金) 23:11:05 - ファイト 細胞培養におけるEDTA溶液について質問があります。 もし知ってる方がいらっしゃれば教えていただけるとありがたいです。 通常、HEK293細胞などの吸着細胞をディッシュから剥がす際に、トリプシンを使用するかと思いますが、トリプシンの代わりにEDTAを使用する事はあるのでしょうか？ トリプシンにEDTAを加えてキレート効果を上げる事はしっているのですが、EDTA単体で効果があるのかということについて知りたいです。 どうぞ宜しくお願いします。

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