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(無題) 削除/引用 No.10240-6 - 2022/02/10 (木) 09:42:34 - s addgeneのorder historyを確認したところ、過去に購入したプラスミドのうち5つがstbl3推奨でしたが特に気にせず通常の株で増やしていました。いずれにしろ精製したプラスミドを泳動すればわかることです。参考までに。

(無題) 削除/引用 No.10240-5 - 2022/02/09 (水) 21:24:09 - まる G25さん ありがとうございます。基本的なことを理解できてなかったです、、 とてもよくわかりました。ありがとうございます。

(無題) 削除/引用 No.10240-4 - 2022/02/09 (水) 19:16:38 - G25 PCRのテンプレートに使うのであれば、量も純度も低くてもいいわけで（少なくとも形質転換の十分な量と質があるのだからPCRには十分でしょう）わざわざ人に聞かなくても良いようなものですけどね。 ただ、プラスミドをインタクトな形で増幅したり保存したりするには、インストラクション通り大腸菌を形質転換すべきでしょう。 >推奨がstbl3推奨ですが、DH5αでは難しいでしょうか？ わざわざstbl3推奨になっているのであれば、LTRなど反復配列を含んでいたりして組換えが起こりやすいコンストラクトであるはず。DH5alphaに入れて殖やすことはできるけど、組換えで崩れる危険性が高くなるということを心得て置かなければなりません。宿主がなんであれ、あなたが扱っているうちに組換えが起こるかもしれないし起こらないかもしれない。どう考えどうやるかはあなた次第。

(無題) 削除/引用 No.10240-3 - 2022/02/09 (水) 18:49:57 - まる ありがとうございます。 チューブに入った溶液状態ですが、このままこれをテンプレートにしてPCRしても可能でしょうか？純度は問題ない数値でした。 推奨されるコンピテントセルを見ておらず、持っていなかったので、、、。推奨がstbl3推奨ですが、DH5αでは難しいでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.10240-2 - 2022/02/09 (水) 17:20:31 - G25 Instruction読みましたか？ https://www.addgene.org/recipient-instructions/myplasmid/#dna

addgeneで購入したプラスミドについて 削除/引用 No.10240-1 - 2022/02/09 (水) 16:39:20 - まる addgeneからプラスミドを新しく購入しました。濃度等記載がないのですが、この場合適当量（例えば10μL程度？）のTEで溶解し、それを大腸菌にトランスフォーメーション、ミニプレップ、、という一連の流れで増やすしかないでしょうか？

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