Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

Ambion Wt Expression Kitを使いFFPE由来サンプルを増幅 トピック削除
No.102-TOPIC - 2012/01/31 (火) 20:17:05 - G
FFPE由来RNAサンプルを、Ambion WT Expression Kitで増幅し、その後、Affymetrix社のGeneArray解析をされたことはありますか。

もし、ある場合、RNAの持ち込み量は、どのくらいでしょうか。
また、増幅したcDNA量はどうでしたでしょうか。

GeneArrayの解析結果もあれば、教えていただけるとありがたいです。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



8件 ( 1 〜 8 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.102-8 - 2012/02/01 (水) 17:04:50 - G
ありがとうございます。

検討をしてみます。

Nugen HP 削除/引用
No.102-7 - 2012/02/01 (水) 15:50:55 - ema
おそらくWT-OVATION™ FFPE SYSTEMを利用することとなります。
日本だとMedbicが今輸入代理店で、NugenのHPからダウンロードできるファイルがありまして、Affymetrixとかの対応条件、むこうが確認した実験データすべてあります。
http://www.medibic.com/product/nugen.html
http://www.nugeninc.com/nugen/index.cfm/applications/rna/rna-micro/

(無題) 削除/引用
No.102-6 - 2012/02/01 (水) 15:24:00 - G
参考になる情報をありがとうございます。

もし宜しければ、お薦めのOvation Systemを教えていただけますと
大変助かります。

分解RNA 削除/引用
No.102-5 - 2012/02/01 (水) 13:32:06 - ema
FFPE由来RNAサンプルは回収しても非常に分解しているので、OvationSystemでの標識をお勧めします。(現在非公式でAffymetrixもAgilentも認めています)おそらく通常のAmbion WT Expression KitではT7 Primerでの増幅ができない遺伝子が大半だと思います。
シグナル的にはOvationSystemを使用した方が低く特徴的になるので、Ambion WT Expression Kitのデータと単純比較はしない方がよいです。
ただ、上がっている遺伝子下がっている遺伝子の方向性はあまり変わらないでの同じ標識条件では遺伝子抽出はできます。
が、OvationSystemで1.5倍あがっているのが、Ambion WT Expression Kitでは5倍あがっているとかの状況は発生するので過去データとか品質の良いデータとの比較は止めてくださいね。

分解RNA 削除/引用
No.102-4 - 2012/02/01 (水) 13:25:55 - ema
FFPE由来RNAサンプル

(無題) 削除/引用
No.102-3 - 2012/02/01 (水) 09:00:40 - G
これから使ってみたいと考えています。
何か、情報がございましたら、宜しくお願いいたします。

(無題) 削除/引用
No.102-2 - 2012/02/01 (水) 08:31:41 - Harmonia
これから使いたいのか、
使って失敗したのか。

後者なら、どうやって、どんな結果が得られたか。

Ambion Wt Expression Kitを使いFFPE由来サンプルを増幅 削除/引用
No.102-1 - 2012/01/31 (火) 20:17:05 - G
FFPE由来RNAサンプルを、Ambion WT Expression Kitで増幅し、その後、Affymetrix社のGeneArray解析をされたことはありますか。

もし、ある場合、RNAの持ち込み量は、どのくらいでしょうか。
また、増幅したcDNA量はどうでしたでしょうか。

GeneArrayの解析結果もあれば、教えていただけるとありがたいです。

8件 ( 1 〜 8 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。