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PBの、アルカリ性の方でPFA溶かす 削除/引用 No.10168-6 - 2022/01/17 (月) 19:45:20 - MM PBの、アルカリ性の方＋水をレンチンしてホットスターラーで60度湯煎にしておいてPFA溶かすとあっさり溶けるので、NaOHとか入れるより楽。で、冷やしてあとから酸性の方を入れる。pH試験紙で7.4か確認。いつも一定量で、だいたいpH合うので、ながくこの方法。用時調整だと切れ味が違います。粒PFA（粉はダメ、舞うから危険）でも古くなると酸化してpH変わる（酸に）ので、pH合わなくなったら新しいのあけるべし。 そして、胸郭をあけてから30秒以内に灌流開始できなかったら捨てる。スピード命です。 前灌流はPBS1-2mLを三方活栓で先に入れておき、シリンジぶら下げて等圧灌流です。

(無題) 削除/引用 No.10168-5 - 2022/01/14 (金) 14:54:17 - AA 些末な点ですが、PBSのほうが塩を含むので乾燥時に析出してきやすいのでペリスタポンプ内部などに入り込むと面倒、というのはあります。

PFA 削除/引用 No.10168-4 - 2022/01/14 (金) 13:33:59 - 質問者 皆様ありがとうございます。 色々教えて頂き調べてみた結果、基本的には固定の度合に差が出る程度なようですね。 参考にさせて頂きます。

(無題) 削除/引用 No.10168-3 - 2022/01/12 (水) 20:00:07 - あの 過去スレに同じようなやりとりありました http://kenkyuu2.net/cgi-biotech2/biotechforum.cgi?mode=view;Code=336

(無題) 削除/引用 No.10168-2 - 2022/01/12 (水) 19:33:37 - あの PBとPBSの間の浸透圧や塩濃度の差をどう考えるか次第でしょうね。 どのくらいの時間でその差が、目標物に影響するか。 まあ 迷ったら、PBS選んどいた方が良さそう。特に灌流固定の段階では。

4％PFAの溶媒 削除/引用 No.10168-1 - 2022/01/12 (水) 10:29:03 - PFA 4％パラホルムアルデヒドの調製時に PFA粉末の溶媒をPBを用いて調整するか、PBSで調整するかの違いは何なのでしょうか。（そこの違いが影響してくる実験系などはあるのでしょうか） マウスのかん流固定用の固定液として用い、サンプルは免疫染色等に使用予定です。

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