Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る　|　トピック一覧　|　研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム（readのみ）

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

メチル化感受性制限酵素使用によるDNAメチル化解析 トピック削除
No.10111-TOPIC - 2021/12/16 (木) 20:12:00 - LIO
お世話になっております。

現在、ある遺伝子のプロモーター領域に存在するCpGアイランドのメチル化状態を、メチル化感受性制限酵素処理後にRT-qPCRをし、DNAメチル化を定量しようと考えております。
それに伴い、ポジコンとして市販の全CpGがメチル化されているDNAを購入し使用しましたが、PCRにより増幅されるはずの配列が増えません。
マウスの脳より採取したDNAでは増えており、塩基配列も確認し、プライマーは問題ないと考えております。

そこでDNAのメチル化の定量をする際に一般的にポジコンとして用いられるもの、方法をご存じでしたら教えて頂きたいです。
宜しくお願い致します。
　
- このトピックにメッセージを投稿する -



全1件 ( 1 〜 1 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

メチル化感受性制限酵素使用によるDNAメチル化解析 削除/引用
No.10111-1 - 2021/12/16 (木) 20:12:00 - LIO
お世話になっております。

現在、ある遺伝子のプロモーター領域に存在するCpGアイランドのメチル化状態を、メチル化感受性制限酵素処理後にRT-qPCRをし、DNAメチル化を定量しようと考えております。
それに伴い、ポジコンとして市販の全CpGがメチル化されているDNAを購入し使用しましたが、PCRにより増幅されるはずの配列が増えません。
マウスの脳より採取したDNAでは増えており、塩基配列も確認し、プライマーは問題ないと考えております。

そこでDNAのメチル化の定量をする際に一般的にポジコンとして用いられるもの、方法をご存じでしたら教えて頂きたいです。
宜しくお願い致します。
全1件 ( 1 〜 1 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール  　アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます）
上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません）
解決（問題が解決した際にチェックしてください）
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 
〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。