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(無題) 削除/引用 No.10109-4 - 2021/12/23 (木) 14:37:28 - tt 元の書き込みについては、様々なことが指摘可能かと思います。 まず、FCM で観察できるのは蛍光であり、蛋白の発現レベルそのものではありません。したがって「MHCの発現が低下した」と結論づけるまえに、「本当に現在の実験系でMHCの発現レベルが正しく測定できているかどうか」は確認が必要かと思いました。 一方上記が上手くいっていると仮定した場合のトラブルシューティングについては「すべてのLPS刺激群で顕著なMHC�U発現の低下」というところが気になります。また、ここでいう「顕著」という言葉も実際のデータと比してどうかは分かりません。例えば、上記の実験条件では濃度に依存してMHCの蛍光シグナルが変化するのでしょうか。50 ng/ml が現在のところ一番低い濃度のようですが、補足実験としては、これをさらに希釈していくとどうなるかというのを、自分であれば取り敢えず試してみるだろうと思います。

(無題) 削除/引用 No.10109-3 - 2021/12/21 (火) 15:33:33 - うーん 要因については分かりませんが、何検体行いましたか？ 一検体であれば、数検体試す必要があると思います。 LPSの他にTNF-αやOK432などでの刺激もやってみてはいかがでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.10109-2 - 2021/12/15 (水) 18:12:36 - q 専門ではないですが，処理時間が長くてダウンレギュレーションされたってことはないですか？

LPS刺激でMHC�U発現が低下した、、、 削除/引用 No.10109-1 - 2021/12/15 (水) 16:31:04 - BMDM マクロファージや樹状細胞などの抗原提示細胞の活性化マーカーと知られているMHC�U分子の発現量が無刺激BMDMと比較して、LPS刺激BMDMで低下してしまいました。 実験内容としては、L929 mediumにより分化誘導させたのBMDMをM1型BMDMへ誘導させたく、LPS刺激を行い、その指標のひとつとしてMHC�U分子発現量を評価しました。 検討条件としては、分化後のBMDMへLPS刺激（0,50,100,500,1000ng/ml）を行いました。定量方法としては、FCM解析によりgMFIを算出しました。 しかし、結果としては、0ng/ml群と比較して、すべてのLPS刺激群で顕著なMHC�U発現の低下が引き起こってしましました。 多くの文献では、活性化刺激によりBMDM上のMHC�U発現が上昇するという記述がされているのですが、なぜ本実験ではその逆の現象が見られてしまうのでしょうか。 ご指導ご鞭撻のほどよろしくお願いします。

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