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スフェロイドの接着方法を教えてください
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No.10058-TOPIC - 2021/11/21 (日) 17:02:49 -
くろろん
現在iPS細胞からスフェロイド状のある細胞へ分化させています。
スフェロイド30個ほどを1%ゼラチンコーティングした6pデッシュに播きましたが、接着しませんでした。
免疫染色などを行うために接着させたいのですが、いい方法はありませんでしょうか。
スフェロイド状のものに透過処理を行えば、接着させなくても抗体が中に入ってくれそうということは認識していますが、試薬が高いのでなるべく接着の方向性で行きたいと考えてます。
宜しくお願い致します。
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No.10058-5 - 2021/11/25 (木) 23:30:08 -
くろろん
>-_-様
ご返信ありがとうございます。神経系でよく使われるようですね!
>おお様
1o無いくらいのサイズで、それを1つの実験で10個くらいしか使えないため、切片は作りづらいと考えています。
>ema様
3次元的に見てもいいと思うのですが、今回は接着させて2次元に近い感じで見れたらと思っていました。スフェロイドにすることには成功しております。
試行錯誤の結果、最終的にiMatrix-silkで接着出来ました!
免染にも成功しました。
ご意見ありがとうございました。
(無題)
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No.10058-4 - 2021/11/22 (月) 18:55:14 - ema
おそらく3次元的にスフェロイドのままで観察したいためのご質問と思います。最終目標が免染なら
https://www.sumibe.co.jp/product/s-bio/cell-culture/cell-able/index.html
のようなものはいかがでしょうか。
(無題)
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No.10058-3 - 2021/11/22 (月) 04:24:13 - おお
>スフェロイド状のものに透過処理
これで悩む投稿が散見されるのだけど、凍結とかパラフィン包埋で切片作るという発想に至らない事が多いようで、なんかだめな理由があるんですかね。
(無題)
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No.10058-2 - 2021/11/21 (日) 23:31:14 - -_-
マウスの神経幹細胞のスフェロイドなら ポリ-D-リジン/ラミニンでコートしていました。。
何かその細胞に合ったものがあると思います。
スフェロイドの接着方法を教えてください
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No.10058-1 - 2021/11/21 (日) 17:02:49 -
くろろん
現在iPS細胞からスフェロイド状のある細胞へ分化させています。
スフェロイド30個ほどを1%ゼラチンコーティングした6pデッシュに播きましたが、接着しませんでした。
免疫染色などを行うために接着させたいのですが、いい方法はありませんでしょうか。
スフェロイド状のものに透過処理を行えば、接着させなくても抗体が中に入ってくれそうということは認識していますが、試薬が高いのでなるべく接着の方向性で行きたいと考えてます。
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