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(無題) 削除/引用 No.10025-6 - 2021/11/11 (木) 21:52:23 - 実験初心者 すみません。誤投稿してしまいました。 ↓

播種細胞数をサンプル間で差をつけること 削除/引用 No.10025-5 - 2021/11/11 (木) 21:47:26 - 実験初心者 6ウェルプレートを用い、薬剤処理を48時間行って、コントロールサンプルと薬剤処理サンプルのタンパクを回収しています。 薬剤処理サンプルは細胞死が起こるので、当然同じ細胞数を播種して開始すれば、回収時に薬剤処理サンプルの回収量が極端に低くなってしまいます。 そのため、できるだけタンパク回収量を多くするため、薬剤処理サンプルの播種細胞数を多くしようとしているのですが、播種細胞数、細胞密度の違いにより、結果に影響を与える可能性はありますか？　やはり、同じ播種細胞数で条件を一緒にした方がいいですか？

(無題) 削除/引用 No.10025-4 - 2021/11/11 (木) 17:58:04 - G25 私たちは、8%~40% PFAを小分けにしてフリーザー保存ししています。年単位で保ちます。用時に4%等のworking conc. にして4℃保存で1週間くらいの間、使用します。ストックには多少、不溶PFAがでますけれど、濃度が薄ければ希釈すると問題ないくらいになりますし、かなり残るようなら濾過すればよろしい。4%という薄い濃度なら溶け残りや析出はそれほど問題ないのではないでしょうか。 もともとPFAにしろ、染色色素にしろ、組織学でつかうような試薬は溶け残りが出るもので、濾過して仕上げることがあっても当たり前だと思ってます。それは調製済み市販品だって大差ないでしょう。 なお、PFA, FAの劣化は酸化してギ酸を生じることにあります。 劣化のチェックはpHをpHペーパーで見るのが簡便かつ効果的。 新鮮なPFA, PA溶液はほぼ中性であるはず（中性に持っていかないと溶けない）。しかし、分解が進んでギ酸を生じてくるとpHが下がってきて、 劣化の進んだ液はpH 4くらいまで下がります。 実験のデリケートさにもよりますが、pH 6を下回っているような溶液は避けたほうが良いでしょう。

(無題) 削除/引用 No.10025-3 - 2021/11/11 (木) 08:19:35 - RE 以前私も凍結保存しようとしたことがありましたが、凍結融解後のPFA液がかなり白濁しており、気持ち悪かったので使うのをやめたことがあります。 これは普通のことでしょうか？凍結の仕方が悪かったのでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.10025-2 - 2021/11/10 (水) 09:03:56 - PYK 小分注し-30度に保存すれば、数カ月から1年くらいは持つイメージです。

PFA の使用期限 削除/引用 No.10025-1 - 2021/11/09 (火) 21:05:39 - １２３ 4% PFA は開栓後どのくらいで使い切りにされていますか？

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