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ライセートは均一か
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No.10006-TOPIC - 2021/10/27 (水) 22:12:23 - lol
抽出したばかりの組織のライセートは均一な溶液だと思うのですが、
定量の際にもピペッティングしてから使用していますか?
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No.10006-7 - 2021/10/28 (木) 14:26:25 - lol
皆さまありがとうございます。
心配ならとりあえず混ぜれば良いのですが、サンプルが50とか数が多いと、これを全てピペッティングするのはちょっとしんどいと思ってしまいました。
転倒混和やボルテックスはそれほど負担にはなりませんが、ボルテックスはモノによってはしてはいけないものもあるのがネックです。
(無題)
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No.10006-6 - 2021/10/28 (木) 12:47:08 - み
遠心後の上清なら均一と信じて一部を定量に使用しています。
脂肪含有量が高い組織由来だと上清の一番上部に脂質の層が形成されるから内部からピックアップするようにしている。
蛋白抽出物をボルテックスなんてしてはいけないと思う。
変性するでしょう。
凍結保存していたものでも、融解後軽く転倒混和すれば均一になる(凍結融解すると一部の蛋白が不溶化することがあるからその扱いには注意が必要だと思うけど)。
(無題)
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No.10006-5 - 2021/10/28 (木) 12:41:32 - G25
おそらくすべての成分が可溶性ということはなく、微粒子状のまま懸濁しているだけで短時間で沈降するようなものもあるだろうし、DNAなど粘性のある成分があれば、溶液にムラがあるかもしれないし、脂質などが相分離してるかもしれない。
そこまで考えていなくても、分取前には無意識に混合しますけど。特殊な場合を除き、混合することに害はないし。
(無題)
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No.10006-3 - 2021/10/28 (木) 11:56:53 - lol
ありがとうございます。
凍結保存していたものでなくても、ボルテックスした方がいいのですね。
(無題)
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No.10006-2 - 2021/10/28 (木) 08:16:09 -
TS
通常はボルテックスしてます。
ライセートは均一か
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No.10006-1 - 2021/10/27 (水) 22:12:23 - lol
抽出したばかりの組織のライセートは均一な溶液だと思うのですが、
定量の際にもピペッティングしてから使用していますか?
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