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脱架橋は必要なし 削除/引用 No.848-2 - 2011/08/31 (水) 13:06:08 - ナデシコ組 IPしたらビーズを鋳型にPCRすればよろしい。 税金つかってるんだから、研究に素人も玄人も関係ない。 あり／なしで半分ずつ試せば数時間で結果がでるような内容を人に聞いて何の得があるの？

ChIPのreverse crosslinkingについて 削除/引用 No.848-1 - 2011/08/30 (火) 14:06:17 - 素人です ChIPのことでぜひとも教えていただきたいことがあります。 以前のプロトコールでは IP後のビーズをhigh　salt　Bufferなどで5回ほどwashした後 elution　Bufferでeluteしてから 高Naで6時間ほど反応させreverse　crosslinkingし そのあとproKで蛋白消化する手法だったと思います。 ところが 磁器ビーズの最近のプロトコールを読むと IP後のビーズをwashした後 eluteせずにビーズごと revers crosslinking bufferとProKで反応させ DNAを回収する方法のようです。 （UpstateのMagna ChIPやinvitrogenのMagnify) なるほどと思いながらも これまで前者でやってきたので 後者でうまくいくか不安です。 やったことがある方いらっしゃいましたら 感想など聞けると嬉しいです。

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