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御礼 削除/引用 No.847-5 - 2011/08/30 (火) 11:58:55 - ＤＮＡ末端の機能化 皆様 たいへんご多用の中、貴重なご意見いただきありがとうございました 勉強して、実践します

PCRは？ 削除/引用 No.847-4 - 2011/08/30 (火) 09:42:21 - mon 30kbくらいのラムダDNAなら標識プライマーを使用したPCRでも標識できるのではないでしょうか。 配列に多少のエラーが許されるなら、ですが。

(無題) 削除/引用 No.847-3 - 2011/08/30 (火) 09:37:54 - mon cos末端は突出末端になっているから、相補的な末端修飾済みOligoDNAをligationすると標識できると思います。この場合は原理的に２つの末端が標識されます。修飾する末端は5'端か3'端のどちらが良いかは調べてください。修飾するのが3'端だとすると5'端はあらかじめ合成時にリン酸化しておいた方が良いと思います。酵素で5'端リン酸化もできますが、可逆反応なので100%標識にはならないので。

(無題) 削除/引用 No.847-2 - 2011/08/30 (火) 09:25:22 - ~ 市場にその様な試薬があるのか知りませんが、既に調査されているようですので無いと考えていいのですよね。 http://catalog.takara-bio.co.jp/product/basic_info.asp?catcd=B1000354&subcatcd=B1000442&unitid=U100004490 原理としては、これが使えるのでは。 ビオチンの代わりに、目的の基を持つ物質をdUTPにつけるように検討されてはいかがでしょうか。

ＤＮＡ末端の機能化 削除/引用 No.847-1 - 2011/08/29 (月) 22:16:29 - ＤＮＡ末端の機能化 以前、どなたかＤＮＡの標識化について質問されていますが、私はλＤＮＡの末端をアミノ基あるいはカルボキシル基で修飾したく、いろいろと調査しております。オリゴなら合成時に機能化することは知っているのですが 長鎖に関しては、なかなかそういう情報が見つかりません 化学的あるいは酵素反応的に　λＤＮＡなどの長鎖ＤＮＡの末端のみを機能化する手法はありますでしょうか？

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