バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「
新しいトピックを作る
」から書き込みをしてください。
質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。
トピック一覧
|
研究留学ネットに戻る
最新のフォーラム
|
このフォーラム
|
ひとつ前のフォーラム(readのみ)
このスレッドをはてなブックマークに追加
はがれやすい脳切片
トピック削除
No.833-TOPIC - 2011/08/26 (金) 05:43:13 - よろしくお願いします
クライオスタットで薄切した脳切片を薄切したその時にコーティングしたスライドグラスに直接貼り付け、染色(初めの水につけるだけで)を行ったところほぼ全てはがれてしまうことがあります。同じ条件で別の日に染色したものは全く問題なかったりし、何が原因なのか教えて下さいますでしょうか。
固定は灌流固定をし、数日〜数週後に凍結保存しています。
よろしくお願いします。
-
このトピックにメッセージを投稿する
-
全
5
件 ( 1 〜 5 ) 前 | 次
1
/
1.
/
1
ありがとうございました
削除/引用
No.833-5 - 2011/09/01 (木) 04:41:33 - よろしくお願いします
乾燥と常温化は出来ていると思います。というよりずっと常温で放置しています。どれくらい放置できるものなのでしょう。
PBSで試してみましたが、染色性も全く変わらず、剥がれ落ちないので水は駄目だと理解できました。
(無題)
削除/引用
No.833-4 - 2011/08/31 (水) 02:47:52 - ポスドク4
冷凍庫から切片を取り出した後、常温に10分程度置き、乾燥と常温化を行うということはされましたでしょうか。
あとは、別の方もおっしゃっているように、PBSを使うべきと思います。
ありがとうございます
削除/引用
No.833-3 - 2011/08/31 (水) 00:16:42 - よろしくお願いします
詳しく教えてくださりありがとうございます。
PBSで試してみようと思います。
(無題)
削除/引用
No.833-2 - 2011/08/29 (月) 14:30:18 - 組織
凍結切片の場合、既固定の切片であっても、最初にDWに漬けるとふやけた感じになり剥がれてしまうことがあります。免疫染色の場合は、プロトコール上どうしても固定が弱めになるからかなと思っています。パラフィン切片ではまず起こりませんね。
対応策としては、DWの代わりに、PBSにつけるようにすれば剥がれなくなると思います。
不思議なのは、一通り染色が終わった後(例えばDAB発色の後)だと、DWに長めに漬けても全く問題ないことですね。まあ剥がれなければ問題ないので、特に検証はしてませんが。
はがれやすい脳切片
削除/引用
No.833-1 - 2011/08/26 (金) 05:43:13 - よろしくお願いします
クライオスタットで薄切した脳切片を薄切したその時にコーティングしたスライドグラスに直接貼り付け、染色(初めの水につけるだけで)を行ったところほぼ全てはがれてしまうことがあります。同じ条件で別の日に染色したものは全く問題なかったりし、何が原因なのか教えて下さいますでしょうか。
固定は灌流固定をし、数日〜数週後に凍結保存しています。
よろしくお願いします。
全
5
件 ( 1 〜 5 ) 前 | 次
1
/
1.
/
1
パスワード
を入力してチェックした記事を
チェックした記事を
このトピックにメッセージを投稿する
名前
メール
アドレス非公開
タイトル
本文
設定
クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証
半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信
〔使い方〕
「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。