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塗抹標本ができません。 トピック削除
No.827-TOPIC - 2011/08/25 (木) 12:11:21 - 染色男
初めまして。染色男です。

現在、精子の塗抹標本を作っているのですがうまくいきません。
助けてください。

手順
1、ゼブラフィッシュの精子を100μlのPBSに単離。
2、精子の入ったPBSをスライドガラスに伸ばす。
3、スライドガラスを扇風機で一晩乾燥させる。
4、スライドガラスをメタノールに浸ける。

4の段階で、精子がスライドガラスから全て剥離してしまいます。
乾燥が足らないのかと思い、ドライヤーの熱風でさらに乾かしてからメタノールに浸けても結果は同じでした。

どこに問題があるのでしょうか?
よろしくお願いいたします。
 
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nanasi様ありがとうございます。 削除/引用
No.827-3 - 2011/08/25 (木) 14:15:55 - 染色男
nanasi様、早速のレスポンスありがとうございます。

PSBの代わりにFBSを使ってみる・・・早速試してみます!

(無題) 削除/引用
No.827-2 - 2011/08/25 (木) 12:50:59 - nanasi
貼り付けるときに蛋白が過剰にあったほうが上手くできます。

血液標本の場合は過剰な蛋白として血漿成分があります。

培養浮遊細胞のサイトスピン標本を作る場合も、PBSではなくFBSで作成したほうが上手く接着します。

もしかしたら精子の場合もPBSではなくFBSを使ってみるといいかもしれません。

後は、スライドガラスの工夫でしょうか。
松浪ガラスから出ているMASコートが接着力が強いといわれています。

塗抹標本ができません。 削除/引用
No.827-1 - 2011/08/25 (木) 12:11:21 - 染色男
初めまして。染色男です。

現在、精子の塗抹標本を作っているのですがうまくいきません。
助けてください。

手順
1、ゼブラフィッシュの精子を100μlのPBSに単離。
2、精子の入ったPBSをスライドガラスに伸ばす。
3、スライドガラスを扇風機で一晩乾燥させる。
4、スライドガラスをメタノールに浸ける。

4の段階で、精子がスライドガラスから全て剥離してしまいます。
乾燥が足らないのかと思い、ドライヤーの熱風でさらに乾かしてからメタノールに浸けても結果は同じでした。

どこに問題があるのでしょうか?
よろしくお願いいたします。

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