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組み替え大腸菌で組み込みタンパク質の発現 トピック削除
No.809-TOPIC - 2011/08/22 (月) 17:01:26 - CTAB
いつもお世話になっております。
タンパク発現用のプラスミドベクターにORFが2つ以上入ったインサートを組み込み、大腸菌で発現させたいと考えています。
お聞きしたいのは、
1、たとえばNovagenのAccepTor Vector Kitsのようにタンパク発現用ベクターで開始コドンをインサート増幅用のPCRプライマーに含めるように指示するタイプのものは、複数のORFを含むインサートで複数のタンパクの発現はできないのでしょうか? できない場合そのような場合に使われるベクターをご教授ください。
2、内在配列のORFを発現しないタイプのVectorでもSD配列などをすべて含んでいれば発現すると思うのですが、発現すると記載されているベクターと、発現すると記載されていないタイプのベクターは何が違うのでしょうか?
勉強不足で申し訳ありませんが、ご存じの方がいらっしゃいましたら、お願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.809-5 - 2011/08/24 (水) 13:57:13 - bb
http://togetter.com/li/161602

(無題) 削除/引用
No.809-4 - 2011/08/23 (火) 13:51:38 - CTAB
モモさま
ありがとうございます。
早速調べてみました。pCOLADuet-1という商品はすでに販売中止しているようでしたが、その方面から勉強してみたいと思います。
ありがとうございました。

aさま
プラスミドは同じ種類では不和合性が出てしまいますので、難しいかと思います。不和が起こらないくらい別種のプラスミドなら大丈夫なのかもしれませんが、組み替え大腸菌に入れるベクターでそこまでの変化はたぶん出ない気がします。ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.809-3 - 2011/08/22 (月) 20:37:33 - a
plasmidを二つ入れるとか?

(無題) 削除/引用
No.809-2 - 2011/08/22 (月) 18:33:29 - モモ
AccepTor Vector Kitsで2つの蛋白が同時に発現できるかどうかは知りませんが、私はpCOLADuet-1というので2つの蛋白を発現させてます。

組み替え大腸菌で組み込みタンパク質の発現 削除/引用
No.809-1 - 2011/08/22 (月) 17:01:26 - CTAB
いつもお世話になっております。
タンパク発現用のプラスミドベクターにORFが2つ以上入ったインサートを組み込み、大腸菌で発現させたいと考えています。
お聞きしたいのは、
1、たとえばNovagenのAccepTor Vector Kitsのようにタンパク発現用ベクターで開始コドンをインサート増幅用のPCRプライマーに含めるように指示するタイプのものは、複数のORFを含むインサートで複数のタンパクの発現はできないのでしょうか? できない場合そのような場合に使われるベクターをご教授ください。
2、内在配列のORFを発現しないタイプのVectorでもSD配列などをすべて含んでいれば発現すると思うのですが、発現すると記載されているベクターと、発現すると記載されていないタイプのベクターは何が違うのでしょうか?
勉強不足で申し訳ありませんが、ご存じの方がいらっしゃいましたら、お願いいたします。

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