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植物の組織切片作成に関して トピック削除
No.806-TOPIC - 2011/08/20 (土) 23:48:21 - シャーレ
現在、シロイヌナズナの研究をしていて、主茎の組織切片を作成しようとしています。

FAAで固定して、パラフィン置換したところまでは、行けたのですが、
スライドガラスに貼付けた後、脱パラフィンをしている間に貼付けた切片がはがれてしまいます。

これは、接着が甘いのでしょうか?
それとも、脱パラフィンがおかしいのですかね?

ちなみに、貼付けは、1%ゼラチンを塗って貼付けています。

また、脱パラフィンは、キシレン液にスライドごと入れて、その後、エタノール溶液中にスライドごと入れて脱パラフィンしています。

周りに切片を作ったことのある人がいなくて、困っています。
どなたかご教授お願いします
 
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(無題) 削除/引用
No.806-2 - 2011/08/21 (日) 12:27:49 - 組織
植物は全くの門外漢なので、動物組織の経験からのコメントですが・・

組織切片が厚すぎる可能性はないでしょうか?
動物ではHE染色で形態観察をする場合、5umくらいの厚さに薄切します。

接着剤がコートされたスライドガラスを使ってみてはどうでしょうか?
これなら剥がれにくいし、わざわざゼラチンを使う必要もなくなります。
市販品ではMAS、APS(シラン)、あるいはこれらの改良品など色々な製品があります。
直接メーカーに相談してみてもいいかもしれません。

植物の組織切片作成に関して 削除/引用
No.806-1 - 2011/08/20 (土) 23:48:21 - シャーレ
現在、シロイヌナズナの研究をしていて、主茎の組織切片を作成しようとしています。

FAAで固定して、パラフィン置換したところまでは、行けたのですが、
スライドガラスに貼付けた後、脱パラフィンをしている間に貼付けた切片がはがれてしまいます。

これは、接着が甘いのでしょうか?
それとも、脱パラフィンがおかしいのですかね?

ちなみに、貼付けは、1%ゼラチンを塗って貼付けています。

また、脱パラフィンは、キシレン液にスライドごと入れて、その後、エタノール溶液中にスライドごと入れて脱パラフィンしています。

周りに切片を作ったことのある人がいなくて、困っています。
どなたかご教授お願いします

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