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訂正、追加です。 削除/引用 No.803-3 - 2011/08/20 (土) 07:02:30 - IF 当然ダメでしょう。＞ダメの可能性が高いでしょう。 固定は別の３つの独立した方法があるようですので、試してみてはいかがでしょう。 1) -10º Cのメタノールで5分間、その後風乾 (推奨方法) 2) 冷アセトンで2分間、その後風乾 3) 1% ホルマリン in PBSで10分間 (湿らせておきます)。 http://www.scbt.jp/protocol_immunofluorescence_cell_staining.html

(無題) 削除/引用 No.803-2 - 2011/08/20 (土) 06:48:41 - IF ウエスタン、IPは良くてもIHC、IFが適応外なのは本当か？　とういことを最近、Bethyl labに直接聞きました。 その会社の抗体はIFが適応外なのがとても多いのです。 実際、公表されていないデータを５種類ほど（再チェックしてくれるというので）調べてもらいましたが、IHCは規格外＝適応外、IFはテストしていないというのがほぼすべてでした。 よってIHCとIFは別物と考えているようでした。ただ、IHCが規格外のせいで＞＞IFはテストしていない　ということかもしれません。 会社に直接問い合わせて、IF規格外ということでしたら、当然ダメでしょう。

細胞免疫染色トラブルシューティング 削除/引用 No.803-1 - 2011/08/19 (金) 23:25:55 - アナキン とある接着分子の組織DAB染色、組織蛍光染色、細胞蛍光免疫染色、Western、FACSをAbcam、Santaの抗体で行った所、いずれの抗体でも 組織DAB染色、Western、FACSはうまくいくのですが、組織蛍光染色、細胞蛍光免疫染色は何度やっても他のタンパクや抗体のようにうまくいきません。 特に細胞免疫染色では最初に4％アルデヒドで固定しますが、この工程で抗体のエピトープが変性してしまうことは有りうるでしょうか？ そういった場合はもっと濃度を低くしたアルデヒドで固定するべきでしょうか？ 似たような御経験のある先生、タンパクの扱いに熟練されている先生方の御意見をお聞かせいただけると幸いです

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