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(無題) 削除/引用 No.772-8 - 2011/08/13 (土) 00:54:48 - 組織 ニッスルの経験はないですが、浮遊法でももちろん可能と思いますよ。ウェルプレートとかマイクロチューブとか適当な大きさの容器の中で、液を交換しながら染色して、最後にスライドガラスにのせて乾燥・はり付けます。その後キシレンになじませて、封入します（非水溶性封入剤の場合）。詳しくはgoogleなどで検索してみて下さい。免疫染色とかin situ hybridizationの技法がたくさんあると思います。ニッスル染色でも切片の扱い方は同じですので。 ただ、切片を薄くしてもいいなら、それが一番簡単です。10-15umなら剥がれずに染色できるでしょう。あと固定は十分されてると思います。

(無題) 削除/引用 No.772-7 - 2011/08/12 (金) 22:23:17 - 丸 ＞ポスドク４様 薄くして、試したいと思います。 >組織様 染色に関して、あまり、詳しくないので、教えて頂きたいのですが、浮遊法でのニッスル染色は可能なのでしょうか？ 固定はPFAで潅流固定、PFAに一晩、つけておき、その後、スクロース置換を行っています。

(無題) 削除/引用 No.772-6 - 2011/08/12 (金) 20:05:49 - 組織 厚さ40umだとはり付け法では難しいかもしれませんね。浮遊法で染色して、最後にガラスにはり付けて、封入すればどうでしょうか。 また、切片が反り返るとのことですが、固定は十分にされてますでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.772-5 - 2011/08/12 (金) 12:49:14 - ポスドク４ 　少し切片が厚いのかもしれません。だからといって薄くするわけにもいかないとは思いますが・・・。

(無題) 削除/引用 No.772-4 - 2011/08/12 (金) 11:13:27 - 丸 ＞ポスドク４様 松浪のMASコートを使用しております。 ＞AA様 コーティングスライドは新しいものを使用しております。 説明不足ですいません。実は、同じことが何回かありまして、 ・乾燥を2日間にした ・コーティングスライドを新しいものにした と試みたのですが、やはり、いくつか切片の端がはがれてしまいました。

(無題) 削除/引用 No.772-3 - 2011/08/12 (金) 09:17:23 - AA スライドの使用期限はいかがでしょうか？ コーティングスライドでも期限が切れていると剥がれるようになることがあります。 私の経験では松浪のMASコートでありました。

(無題) 削除/引用 No.772-2 - 2011/08/12 (金) 09:13:28 - ポスドク４ 　コーティングの種類は何でしょうか。

切片の端がはがれる 削除/引用 No.772-1 - 2011/08/11 (木) 18:44:37 - 丸 マウスの脳の凍結切片を作製し、ニッスル染色を行っています。 ニッスル染色を行っている最中から、切片の端の方がはがれ、封入する際には丸まってしまい、顕微鏡観察がうまくいきません。 大体、切片を50枚程度作製しているのですが、2割くらいがそのような状態です。 流れは、冠状断で40umで切片を作製、コーティングガラスに貼りつけ、2日間乾燥、ニッセル染色を行っています。 なにぶん、このような説明だけで把握して頂くのは難しいと思いますが、何かアドバイスがありましたら、お願いします。

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