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染色体分裂(M期)の写真を撮りたいのですが・・ トピック削除
No.766-TOPIC - 2011/08/09 (火) 22:21:27 - 実験初心者君
分裂期の中心体・微小管・染色体を光学顕微鏡で撮影したいのですが・・。
方法がわかりません。どういったように進めればよろしいのでしょうか?
実験内容は有糸分裂異常を起こす割合をみたいと思っています。
初歩的なことなのか、論文や教科書にも載っておらず、皆様のお知恵をお借りしたく投稿させていただきました。詳しく方法が掲載されているURLでも教科書でもかまいません!詳しい方、何卒よろしくお願いいたします。
 
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施設が持ってる設備 削除/引用
No.766-6 - 2011/08/16 (火) 10:54:37 - ema
うちの方で半年ほど前に実験で、顕微鏡の倍率が足りない機器しか持ってないということで相談を受けた事があります。
染色体までみるには倍率+焦点が結構流れて(1回あわせてても)きれいな写真に苦労した覚えがあります。
>実験内容は有糸分裂異常を起こす割合
1視野あたりなのかとかカウント方法、計算方法も色々あるので、自分なりに決めてください。

(無題) 削除/引用
No.766-5 - 2011/08/13 (土) 17:14:06 - おお
中心体・微小管・染色体のコンポーネントや結合するものをGFPなどの蛍光たんぱく質で標識して(融合たんぱく質として)導入すれば観察できると思います。

(無題) 削除/引用
No.766-4 - 2011/08/10 (水) 10:50:45 - ~
すいません。
光学顕微鏡と書かれているのが、蛍光を検出できない単なる透過光で見るものを想定しているのだと思っていました。

蛍光染色している論文ならば山ほどあると思いますが。
http://courses.washington.edu/pbio558/Readings%20PBIO558/Heald1996Nature.pdf
JBCあたりで探すと、細かいプロトコルも書かれているかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.766-3 - 2011/08/10 (水) 10:32:35 - 実験初心者君
早速のご回答有難うございます。
ギムザ染色ですか!それは考えていませんでした・・。
ですが、できれば教科書に載っているような蛍光免染を行いたいのです。
でもギムザ染色かぁ、完全に頭になかったです。ありがとうございます!

(無題) 削除/引用
No.766-2 - 2011/08/10 (水) 09:35:55 - ~
>どういったように進めればよろしいのでしょうか?
光学顕微鏡ではない顕微鏡の使用ができるように進めていってはいかがでしょうか。

染色体ならばギムザ染色等で見れると思いますが、中心体や微小管を見るのは困難だと思いますが…

染色体分裂(M期)の写真を撮りたいのですが・・ 削除/引用
No.766-1 - 2011/08/09 (火) 22:21:27 - 実験初心者君
分裂期の中心体・微小管・染色体を光学顕微鏡で撮影したいのですが・・。
方法がわかりません。どういったように進めればよろしいのでしょうか?
実験内容は有糸分裂異常を起こす割合をみたいと思っています。
初歩的なことなのか、論文や教科書にも載っておらず、皆様のお知恵をお借りしたく投稿させていただきました。詳しく方法が掲載されているURLでも教科書でもかまいません!詳しい方、何卒よろしくお願いいたします。

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