Bio Technical フォーラム

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p38インヒビター トピック削除
No.739-TOPIC - 2011/08/01 (月) 16:00:54 - とっと
お世話になっています。
p38 MAPKのシグナリングをやっています。
以前、このフォーラムに、p38MAPKの阻害剤であるSB203580を作用させるとp38リン酸化レベルが上がるというトピックスが掲載されました。
私たちも同じ経験をして、理解に苦しんでいましたが、この現象はMPK-1などのネガティブフィードバックによるというフォーラム上での回答でヒントを得ました。その後、論文等を探してみると、そのような現象はいくつか発表されていることが分かりました。
しかし、最後にこの実験をまとめる段になって疑問に思うのは、SB203580でp38のリン酸化レベルが上がるということは、p38の下流の因子の活性化を促進してしまうのではないか?つまりSB203580がシグナル伝達を阻害しないのではないかとも思われるのですが、どのように解釈したら良いかご教授下さい。
ちなみに、シグナル伝達の最終の反応をみるとSB203580は阻害剤として働いていると判断されます。
 
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p38インヒビター 削除/引用
No.739-3 - 2011/08/01 (月) 19:01:13 - とっと
あべちゃん さんへ

早速お教えいただきありがとうございました。
そうですね。標的タンパクのリン酸化で確認できますね。高値な抗体がまた要るけど。
とりあえず、SBのATPポケットへの結合によるp38活性阻害のことを調べてみます。ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.739-2 - 2011/08/01 (月) 18:47:06 - あべちゃん
SBはp38のATPポケットにはまり込んで標的蛋白質を燐酸化できなくなる仕組みだからp38の燐酸化レベルが上昇しても、p38のkinaseとしての活性は阻害されたままなのではないでしょうか?

もしkinase活性が気になるようでしたらkinase assayかp38の標的蛋白質ATF2などの燐酸化抗体などで確認されるといいと思います。

p38インヒビター 削除/引用
No.739-1 - 2011/08/01 (月) 16:00:54 - とっと
お世話になっています。
p38 MAPKのシグナリングをやっています。
以前、このフォーラムに、p38MAPKの阻害剤であるSB203580を作用させるとp38リン酸化レベルが上がるというトピックスが掲載されました。
私たちも同じ経験をして、理解に苦しんでいましたが、この現象はMPK-1などのネガティブフィードバックによるというフォーラム上での回答でヒントを得ました。その後、論文等を探してみると、そのような現象はいくつか発表されていることが分かりました。
しかし、最後にこの実験をまとめる段になって疑問に思うのは、SB203580でp38のリン酸化レベルが上がるということは、p38の下流の因子の活性化を促進してしまうのではないか?つまりSB203580がシグナル伝達を阻害しないのではないかとも思われるのですが、どのように解釈したら良いかご教授下さい。
ちなみに、シグナル伝達の最終の反応をみるとSB203580は阻害剤として働いていると判断されます。

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