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(無題) 削除/引用 No.711-7 - 2011/07/27 (水) 10:02:56 - R5 そうですね・・・。MPは薄まきだと育ちにくいという認識だったのでsubcultureを考えていました。増殖因子とはL929を検討してみます。 皆様ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.711-6 - 2011/07/26 (火) 17:29:56 - ダイゴ 細胞を増やして使いたいのなら、継代するのではなく、予め薄くまきます。増殖因子としてはM-CSF, GM-CSF, L cell mediaなどが使えますので、目的と資金力によって選択します。毎回同じ条件で培養すれば実験結果のバラツキは許容範囲内に収まると思います。使用するマウス数を減らしたかったので、私はこのようにして遺伝子発現解析やChIP assayして、論文にもなりました。

(無題) 削除/引用 No.711-5 - 2011/07/25 (月) 23:08:08 - R5 ご回答ありがとうございます。 ChIPを検討しており、効率良くスケールアップができればよいと安直に考えた次第です。 実験目的次第とはいえ、そもそも継代をしている文献がありませんし、acceptableではないということですね・・・。

(無題) 削除/引用 No.711-4 - 2011/07/25 (月) 22:57:14 - 月詠 わたしの経験的に、チオグリコレートで誘導した腹腔滲出性マクロファージ(TG=PEC)は、接着力が強いわりに物理的に脆弱でスクレーパーで剥がすとかなり死にますし、トリプシン-EDTAでも回収率はよくありません。そもそもPECを継代した論文も拝見したことがありませんので、方法論としてお奨めしかねます。 いかなる理由でTG-PECを継代して用いようとされるのか解りませんけど、滲出性マクロファージ自体が常在性マクロファージよりも活性化された状態である以上、継代による応答能の変化等のリスクを考慮すれば、初代培養限りで用いる方が一般的で無難だと思います。 ネガティブな意見で申し訳ありませんけど、わたしがレビューアーであれば、継代マクロファージを用いた実験結果をそのまま受け入れることはできないと思います（つまり初代培養での追試験結果に差し替えを求めます）。

(無題) 削除/引用 No.711-3 - 2011/07/25 (月) 20:58:42 - R5 ご回答ありがとうございます、一応継代はできるのですね。 増殖因子というとM-CSFをお使いだったのでしょうか。 単に培養維持が目的なら、何回くらい継代されたことがありますでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.711-2 - 2011/07/25 (月) 16:59:32 - ダイゴ スクレイパーを使ってはがすとある程度死にます。増殖因子を入れると数倍に増えますので、目的によっては増殖させ、継代して使っていたこともあります。

腹腔マクロファージの継代 削除/引用 No.711-1 - 2011/07/24 (日) 11:11:58 - R5 よろしくお願いします。 thioglycollate誘導の腹腔マクロファージを使っています。 いつもisolation後にplatingしてそのpassageのみを実験に使っていますが、これは継代できるものなのでしょうか？　可能ならば効率が少し良くなるかと思うのですが・・・。 もちろん、継代によりキャラクターが変化する可能性については承知しております。 ご経験のある方に教えて頂ければありがたいです。

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