Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

最新のフォーラム | このフォーラム | ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

DNA電気泳動 トピック削除
No.678-TOPIC - 2011/07/15 (金) 13:05:52 - ozawa
アガロースゲルでDNAを電気泳動する場合、
1ウェルあたりに何マイクログラムのDNAをアプライすれば
十分にバンドが見えるのでしょうか?

ゲルに流して回収したDNAをもう一度ゲルに流して、本当にきちんと回収できたか確認したいのですが、どれくらいアプライすればいいのかと思いまして。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



4件 ( 1 〜 4 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.678-4 - 2011/07/19 (火) 08:53:20 - ~
回収率は低めに見積もっておきましょう。
100%回収できていると思って検出限界ぎりぎりで流すと、検出できないかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.678-3 - 2011/07/15 (金) 18:03:48 - AP
観察の方法や観察装置の性能にもよると思いますが、EtBr染色、紫外線照射で観る場合、一バンド1-2 ng程度のDNAというのが下限とされているところでしょう。もちろん、紫外線イルミネータがしょぼければそこまでいかないだろうし、Cybr Greenなど、より好感度の染色剤や、レーザースキャナなどを使えばもっといきます。

実用上は、一バンド10 ng以上あれば確実に観察できるでしょう。
ただ、コンタミしているかもしれない、少量のDNA断片の有無を確認するような場合なら、それなりに量が必要です。

(無題) 削除/引用
No.678-2 - 2011/07/15 (金) 14:09:16 - マ
0.1μg流せば十分見えます

DNA電気泳動 削除/引用
No.678-1 - 2011/07/15 (金) 13:05:52 - ozawa
アガロースゲルでDNAを電気泳動する場合、
1ウェルあたりに何マイクログラムのDNAをアプライすれば
十分にバンドが見えるのでしょうか?

ゲルに流して回収したDNAをもう一度ゲルに流して、本当にきちんと回収できたか確認したいのですが、どれくらいアプライすればいいのかと思いまして。

4件 ( 1 〜 4 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。