Bio Technical フォーラム

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組織のフローサイト トピック削除
No.669-TOPIC - 2011/07/13 (水) 19:00:41 - sima
組織のフローサイトで分からないことがあります。
マウスの肝臓や肺をばらばらにして、その後、染色してフローサイトにて表面マーカーを検討してみたいと考えております。
組織をばらばらにする良い方法について、ご教授いただけないでしょうか?
1o程度に細切しメッシュを通して、染色を行う方法や、トリプシン処理を行ってばらばらにする方法等があるようなのですが、どのような方法が最も良いのか、分からず、迷っています。
どうぞよろしくお願い申し上げます。
 
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(無題) 削除/引用
No.669-3 - 2011/07/14 (木) 09:18:55 - ~
細かい手技はともかく、何の酵素や機器を使っているかは論文に書かれているはずですよね。
その中で何が最もよいかは、評価基準を決めて、ラボのインフラや測定目的に応じて評価するしかないのでは。

(無題) 削除/引用
No.669-2 - 2011/07/13 (水) 19:28:28 - 月詠
”最適”な調整法は、FCMの分析の対象とする細胞群にもよると思うのですけど、少なくともトリプシンで消化してしまっては表面抗原まで切断されてしまって正確な分析はできないのではないでしょうか。

酵素を用いる方法としては、肺のような強固な結合組織を破壊する場合や、脾臓や肝臓から樹状細胞を調整するときにコラゲナーゼを用いる手法があったと記憶しています。


自分で論文を検索してもよいですけど、技術上の問題ですのでFCMの会社に問い合わせてみるのが一番早道のように思います。主要な動物組織からFCM分析に最適な細胞調整法に関するデータを蓄積しているはずですから。

組織のフローサイト 削除/引用
No.669-1 - 2011/07/13 (水) 19:00:41 - sima
組織のフローサイトで分からないことがあります。
マウスの肝臓や肺をばらばらにして、その後、染色してフローサイトにて表面マーカーを検討してみたいと考えております。
組織をばらばらにする良い方法について、ご教授いただけないでしょうか?
1o程度に細切しメッシュを通して、染色を行う方法や、トリプシン処理を行ってばらばらにする方法等があるようなのですが、どのような方法が最も良いのか、分からず、迷っています。
どうぞよろしくお願い申し上げます。

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