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(無題) 削除/引用 No.654-7 - 2011/07/16 (土) 00:43:10 - リッコ 774さま また有益な情報をありがとうございます。血清は白濁しています。 恥ずかしながら他の方法は知りませんでした。検討してみたいと思います。

(無題) 削除/引用 No.654-6 - 2011/07/15 (金) 12:41:49 - 774 サンプルは濁ってますか？ ろ過で除けるのは、カイロミクロンやVLDLなど粒子径が大きく、目視で濁りとして確認できるものが主なので、もとから濁りが少ないサンプルでは効果が少ないかもしれません。 ちなみに、デキストラン+マグネシウムやカプリル酸沈澱など他の方法は試されましたか？ 携帯からでリンク貼れないですが、GEヘルスケアジャパンの抗体精製のところにプロトコがあるので、試されたらいかがでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.654-5 - 2011/07/14 (木) 04:30:07 - リッコ ありがとうございます。 TG濃度は400mg/dlくらいです・・・。スモールスケール用（またはPBSでボリュームアップ）の0.45フィルターになるんでしょうかね。 検討させて頂きます！

(無題) 削除/引用 No.654-4 - 2011/07/13 (水) 20:09:02 - 774 TGリッチなリポタンパクが多いと上手くいかない場合が多いです。 0.45マイクロくらいでフィルターろ過するとそういったリポタンパクは除けますから、うまくいくかもしれないです

(無題) 削除/引用 No.654-3 - 2011/07/11 (月) 12:46:06 - リッコ コメントありがとうございます。 実はこの週末に再トライし、21Gのニードルをチューブ壁に突き刺して脂質膜とペレットの中間層を採取しました。 PBSでボリュームを5倍くらいにしましたが脂質膜は消えませんでした。ただ、ボリュームを増やすと中間層の採取は容易になりましたが。

(無題) 削除/引用 No.654-2 - 2011/07/11 (月) 09:57:33 - ~ あらかじめ正常値くらいになるまで(PBSなどで)希釈したらうまくいきませんかね。

高コレステロール血症マウス血清からのHDL分離 削除/引用 No.654-1 - 2011/07/09 (土) 06:42:08 - リッコ よろしくお願いします。 LDLR受容体欠損マウス（高コレステロール食で血中総コレステロール1000mg/dL以上になります）の血清からHDLコレステロールを分離し濃度測定したいと考えています。 リンタングステン酸+塩化マグネシウム添加（実際はBiovision社のキット）でVLDL/LDL分画を沈殿させ、3000g10分で遠心して上清をHDLとして採取します。 通常マウスでは沈殿がペレットを作り、上清の回収も容易なのですが、高コレステロール血症マウスでは白い膜が液面を覆ったまま沈殿を作りません。15000gなど高速で遠心しても変わりません。 どなたか、このようなサンプルからのHDL分離についてよいアイディアをお持ちでしたら教えて頂ければありがたいです。やっぱりHPLCにかけるしかないんでしょうか・・・。

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