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(無題) 削除/引用 No.636-4 - 2011/07/08 (金) 11:18:36 - ぶんかく ありがとうございます。 論文によっては、得られた画分をミトコンドリア内膜としているものがあります。 その方法は内膜だけを可溶化して、他のミトコンドリアの部分は排除させるのではないかと考えていましたが、私の想像の域ですので、あえて書かずにご意見をいただこうと思いました。 やはり、ミトコンドリアの欲しい部分を選択的に抽出するためには、その温度が必要ということなのでしょうか。 もう少し調べてみます。

(無題) 削除/引用 No.636-3 - 2011/07/07 (木) 21:39:09 - おお ちなみに温度が高いほうが界面活性剤の能力はつよくなります。

(無題) 削除/引用 No.636-2 - 2011/07/07 (木) 21:37:52 - おお まずその方法を示した文献などをよみなさい。 気になるなら比べてみるというのはどうでしょうか。 界面活性剤を使うからといって、いつも膜を完全に溶かすとは限らず、まく断片を意図的に作ったりとかいろいろなアプローチがあります。 なぜかについては思い当たることもあるのですが、あなたの実験についてそれが本当かどうか分かりませんのであえて書きません。

界面活性剤の至適温度 削除/引用 No.636-1 - 2011/07/07 (木) 16:08:45 - ぶんかく いつも参考にさせて頂いています。 初心者の疑問で恐縮ですが、教えていただけたら幸いです。 培養細胞のミトコンドリアを分画して、そこに発現するタンパクをウエスタンで調べています。 プロトコールでは10000ｘgで落とした沈殿を1%NP-40を含んだバッファーで懸濁して、最後に1,100×gで20分遠心した上清を取ります。 そして、最後の遠心だけは室温でやるとのことです。 なぜ室温なのでしょうか？ それを4℃で行ってはいけないのでしょうか（どうなるのでしょうか）？

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