アフリカツメガエル神経胚から尾芽胚にかけて、様々な中胚葉性組織を観察しようと思い
パラフィン包埋クロス切片HE染色をしたのですが組織像が鮮明ではありませんでした。
すべての細胞が同じ大きさで粒粒としており組織の区別ができない&神経管や脊索が剥がれている(?)
といった結果になりました。
方法は
[Early Development of Xenopus laevis: A Laboratory Manual]By Hazel L. Sive
のHistologyの章に従いました。サンプルはPFA固定です。また切片の厚さは8umです。
包埋前の脱水、キシレン透徹が甘いのかなと感じて、
脱水、透徹時間をそれぞれ倍にしたのですが結果は改善されませんでした。
やはり両生類などの胚では卵黄が多いために切片にするのが難しいのでしょうか?
どなたかXenopus胚パラフィン切片&HE染色について何かコツをご存知の方がいましたら御教示ください。よろしくお願い致します。 |
|