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Bradford試薬の調整について トピック削除
No.605-TOPIC - 2011/07/01 (金) 06:10:26 - mm
Bradford試薬の調整について質問です。
先日Bradford試薬を調整したのですが、緑色になってしまいました。

調整方法は以下のように行っています。
CBB G-250 20 mgを エタノール 10 mlに溶解。
色素が溶けたら、85 % (w/v)のリン酸 10 mlを加え撹拌。
更に水で200mlにメスアップして、1時間程度撹拌。
調整した試薬をろ紙でろ過。
これを1日静置してから使用しています。

調整が上手くいっていれば赤紫色になると教わったのですが、何度作り直しても緑色になってしまいます。

自分が調整したときは、
CBBをエタノールで溶解する  青色↓
リン酸を加える        赤色↓
水でメスアップ        青色(緑っぽい)↓
1日静置           緑
といった色の変化でした。

どのような原因が考えられるのでしょうか?ご教授お願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.605-4 - 2011/07/01 (金) 09:14:51 - AP
私のレシピ帳をみてみたら、リン酸溶液はその2倍量(20 mL)です。

(無題) 削除/引用
No.605-3 - 2011/07/01 (金) 07:32:48 - AP
それが原因かどうかわかりませんが、
>色素が溶けたら、85 % (w/v)のリン酸 10 mlを加え撹拌。
このリン酸は、試薬リン酸の原液であるべきでは。
試薬として流通しているリン酸は85%(w/w)の水溶液です。

(無題) 削除/引用
No.605-2 - 2011/07/01 (金) 07:03:16 - おお
http://www.thelabrat.com/protocols/BradfordReagent.shtml
燐酸の量が少なくない?

Bradford試薬の調整について 削除/引用
No.605-1 - 2011/07/01 (金) 06:10:26 - mm
Bradford試薬の調整について質問です。
先日Bradford試薬を調整したのですが、緑色になってしまいました。

調整方法は以下のように行っています。
CBB G-250 20 mgを エタノール 10 mlに溶解。
色素が溶けたら、85 % (w/v)のリン酸 10 mlを加え撹拌。
更に水で200mlにメスアップして、1時間程度撹拌。
調整した試薬をろ紙でろ過。
これを1日静置してから使用しています。

調整が上手くいっていれば赤紫色になると教わったのですが、何度作り直しても緑色になってしまいます。

自分が調整したときは、
CBBをエタノールで溶解する  青色↓
リン酸を加える        赤色↓
水でメスアップ        青色(緑っぽい)↓
1日静置           緑
といった色の変化でした。

どのような原因が考えられるのでしょうか?ご教授お願いします。

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