こんにちは。
最近、westernをやっていて気になったことがあります。
SDS-PAGEの後、タンパク質はゲル中に支持されていますよね。
しかし、メンブレンに転写しないと、その内拡散してしまうと思います。
上記の「その内」がどれくらいの期間かが気になります。
普段は、泳動後速やかにblotting bufferとの平衡化を15分程度行い、
速やかに転写しているので気にしたことは無かったのですが、
CBB染色したバンドがいつまでも残っているのを見ると、予想以上に持つんじゃないかと考えました。
（長い間放置していると、少しは拡散しているように見えますが）
そこで、この問題について分かる方がいらっしゃいましたらアドバイスをいただけないでしょうか？
（実用化することは無いと思いますが。）
私は、一日blotting bufferに漬けておいて転写しても、
微量なタンパク質を除いたら検出できるんじゃないかなと予想しています。
ではよろしくお願いします。 |
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