Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

最新のフォーラム | このフォーラム | ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

ニッポンジーンのISOPLANTUの原理 トピック削除
No.543-TOPIC - 2011/06/16 (木) 13:11:52 - KO
こんにちは。キットの原理についての質問ですが・・・

ニッポンジーンのISOPLANTIIを使って酵母のゲノムDNA抽出を
行っているのですが、原理について疑問があり質問させて頂きました。

Solution1で膜を可溶化するのは分かるのですが、次に加える塩化ベンジルは何を
しているのでしょうか?

私はタンパク質沈澱のために加えていると考えていたのですが、
マニュアルを見ますと、細胞壁、細胞膜、核膜を可溶化するとありました。
膜の可溶化はSolutionTでしているため、それだったら、細胞壁の可溶化だけが目的では?と思いました。

また、SolutionV-Aで不溶な物質を吸着しているのと思うのですが、次のSolutionV-Bは何をしているのでしょうか?

実験原理が気になり、質問させていただきました。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



2件 ( 1 〜 2 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.543-3 - 2011/06/16 (木) 14:07:38 - ~
そのキットは使ったことがありませんが。

>Solution1で膜を可溶化するのは分かるのですが、
Solution1で膜を可溶化するというのはどこに書かれているのでしょうか?
Solution1はトリス、EDTA、SDSですよね。
SDSだけでは酵母の細胞壁は十分壊れず、その中にある細胞膜・核膜も十分壊れないために、そのように表記しているのでは?

>次のSolutionV-Bは何をしているのでしょうか?
プロトコルを見る限り、その後でエタ沈してますよね。
素直に考えればエタ沈用の塩では。
おそらくはsolution1はpH8.0位でしょうから、中和の意味は薄いと思います。

ニッポンジーンのISOPLANTUの原理 削除/引用
No.543-1 - 2011/06/16 (木) 13:11:52 - KO
こんにちは。キットの原理についての質問ですが・・・

ニッポンジーンのISOPLANTIIを使って酵母のゲノムDNA抽出を
行っているのですが、原理について疑問があり質問させて頂きました。

Solution1で膜を可溶化するのは分かるのですが、次に加える塩化ベンジルは何を
しているのでしょうか?

私はタンパク質沈澱のために加えていると考えていたのですが、
マニュアルを見ますと、細胞壁、細胞膜、核膜を可溶化するとありました。
膜の可溶化はSolutionTでしているため、それだったら、細胞壁の可溶化だけが目的では?と思いました。

また、SolutionV-Aで不溶な物質を吸着しているのと思うのですが、次のSolutionV-Bは何をしているのでしょうか?

実験原理が気になり、質問させていただきました。

2件 ( 1 〜 2 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。