Bio Technical フォーラム

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タンパク抽出のタンパク分画について トピック削除
No.531-TOPIC - 2011/06/15 (水) 05:38:08 - db
初歩的な質問だと思いますが、教えていただきくてトピックを作成しました。
タンパクを下記の方法で抽出しています。
Homogenization Buffer (50mM Tris-HCL, pH8; 1mM EDTA; 10% glycerol; 0.02% Brij-35)でホモジナイズ。その後、2,000g×10分で遠心。上清でウェスタンブロッティングを行っています。
上記の方法で得られたタンパク質は、核タンパクは含まれていないが、ミトコンドリアや膜が含まれているタンパク質ということで良いのでしょうか？それとも核タンパクも含まれているのでしょうか。
　
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(無題) 削除/引用
No.531-2 - 2011/06/15 (水) 22:33:23 - d
http://faculty.plattsburgh.edu/donald.slish/DiffCent.html

細胞にもよるかもしれませんが。
どうしても気になる、もしくは、核タンパクが存在しているか否かが重要である場合は、何かのタンパクに対してウエスタンをしてみるのがいいんじゃないでしょうか。私も知りたいので、もし実験した時にはお教えください。

タンパク抽出のタンパク分画について 削除/引用
No.531-1 - 2011/06/15 (水) 05:38:08 - db
初歩的な質問だと思いますが、教えていただきくてトピックを作成しました。
タンパクを下記の方法で抽出しています。
Homogenization Buffer (50mM Tris-HCL, pH8; 1mM EDTA; 10% glycerol; 0.02% Brij-35)でホモジナイズ。その後、2,000g×10分で遠心。上清でウェスタンブロッティングを行っています。
上記の方法で得られたタンパク質は、核タンパクは含まれていないが、ミトコンドリアや膜が含まれているタンパク質ということで良いのでしょうか？それとも核タンパクも含まれているのでしょうか。
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