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(無題) 削除/引用 No.518-5 - 2011/06/13 (月) 22:29:06 - おお 35mmディッシュでやればいいと私も思います。 どうしてもというならウェルから細胞をPBSでけんだくして、チューブにうつして、遠心してからライシスしてもいいかもしれませんが、、、あんまりスッキリした解決方法ではないかもしれません。

返信ありがとうございます 削除/引用 No.518-4 - 2011/06/13 (月) 14:06:54 - T TS様 ありがとうございます。なるほど揮発して入っている可能性は十分に考えられます。 ~様 ありがとうございます。サンプリングごとに変える方が賢明ですね。 返答ありがとうございます。やはりディッシュにするなどして、サンプリング日ごとに分けて細胞を撒くことがよいと思いました。大変参考になりました。

(無題) 削除/引用 No.518-3 - 2011/06/13 (月) 09:59:52 - ~ 私は、基本的にはサンプリング日ごとにプレートを分けています。 サンプル量を稼ぎたい場合が多いので、マイクロプレートではなくディッシュでやることもあります。 ６ウェルプレートであれば、35mmディッシュとほぼ同じ直径ですよね。 そちらでやるわけには行かないのでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.518-2 - 2011/06/13 (月) 09:39:33 - TS 間違ってLysis bufferがとなりのWellに入っているのではなく、 インキュベータに戻してから、37度でなにかが揮発して、気相経由で入っているのではないでしょうか。 Lysisの組成にもよるのでしょうが、学生がTrizolで同じようなミスをしておりました。となりのとなりまでは届かないようでしたが。 他の人の細胞にも迷惑がかかるかもしれないので、 変な物をいれたプレートをインキュベータに戻すのはやめた方がよいと私は思います。 やっぱりプレートを別にして実験したらよいでしょう。 あるいはどうしても１枚でやりたければ、 ３日目ものは−３日目、２日目のものは−２日目に分化を開始して、０日目にすべてをサンプリングする、という方法もあるとは思います。 ただし、実験の条件の厳密性とかをクリアできるか考える必要はあると思いますが。

タイムコースでサンプル採取する場合のプレート 削除/引用 No.518-1 - 2011/06/13 (月) 09:05:51 - T いつも大変勉強させてもらっております。 細胞を分化培地に変えてタイムコースで分化０、１、２、３日とタンパク抽出する場合（サンプリング採取量は1wellで十分）、皆様はプレートはそれぞれ１つずつ用意して（0日目用、1日目用、2日目用、3日目用）実験されますでしょうか？１つの6wellプレートを使用してサンプリングすると、どうしても前日にlysis bufferを添加しサンプリングしたwellのとなりのwellの細胞が翌日少し浮いて死んでしまっています。気おつけて添加しても同様のことがおきます。 細胞培養熟練者の皆様はタイムコースでサンプリングしたい場合どのような手法をとられているのか教えていただけませんでしょうか？よろしくお願いします。

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