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BACのTransfer
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No.508-TOPIC - 2011/06/10 (金) 05:40:52 - ぽすどく
BACが入っている大腸菌のStrainを変えたい(Transfer)のですが、概略を教えていただけますでしょうか。
ある論文を読むと、Mini-prep後に、移したい先の種類の大腸菌にElectroporationする、と書いてあるのですが、BACでそのようなことが可能なのでしょうか。(プラスミドではもちろん簡単なのですが)
ご存知の方がいましたら、教えていただければ幸いです。よろしくお願いいたします。
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No.508-4 - 2011/06/10 (金) 09:14:01 - ~
ミニプレップで抽出して、エレクトロポレーションで入れていました。
エレクトロコンピは、50mLチューブで適当に培養してグリセロール溶液で洗っただけですが、とりあえず入りました。
ネックは、入れなおしたBACが元と完全に同じかが全配列のシークエンシングで確認できないところで、
しかたないので注目している部分が入っているかだけはPCRで確認していました。
(無題)
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No.508-3 - 2011/06/10 (金) 06:16:55 - ぽすどく
>ポスドクさん
ありがとうございます。・・・それは手元にあったのですが、P4で止まっていました。P11以降に書いてあったのですね。
助かりました。すみません。
(無題)
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No.508-2 - 2011/06/10 (金) 06:06:49 - ポスドク
ちょっとのぞいてしまいましたので、もし役にたてば。
BACを使った事が無く、勘ですが、このあたりはどうでしょう。
www.med.osaka-u.ac.jp/pub/mr-envi/www/japanese/protocols/img/BAC_protocol_050507.pdf
BACのTransfer
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No.508-1 - 2011/06/10 (金) 05:40:52 - ぽすどく
BACが入っている大腸菌のStrainを変えたい(Transfer)のですが、概略を教えていただけますでしょうか。
ある論文を読むと、Mini-prep後に、移したい先の種類の大腸菌にElectroporationする、と書いてあるのですが、BACでそのようなことが可能なのでしょうか。(プラスミドではもちろん簡単なのですが)
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