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BACのTransfer トピック削除
No.508-TOPIC - 2011/06/10 (金) 05:40:52 - ぽすどく
 BACが入っている大腸菌のStrainを変えたい(Transfer)のですが、概略を教えていただけますでしょうか。

 ある論文を読むと、Mini-prep後に、移したい先の種類の大腸菌にElectroporationする、と書いてあるのですが、BACでそのようなことが可能なのでしょうか。(プラスミドではもちろん簡単なのですが)

 ご存知の方がいましたら、教えていただければ幸いです。よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.508-4 - 2011/06/10 (金) 09:14:01 - ~
ミニプレップで抽出して、エレクトロポレーションで入れていました。
エレクトロコンピは、50mLチューブで適当に培養してグリセロール溶液で洗っただけですが、とりあえず入りました。

ネックは、入れなおしたBACが元と完全に同じかが全配列のシークエンシングで確認できないところで、
しかたないので注目している部分が入っているかだけはPCRで確認していました。

(無題) 削除/引用
No.508-3 - 2011/06/10 (金) 06:16:55 - ぽすどく
>ポスドクさん

 ありがとうございます。・・・それは手元にあったのですが、P4で止まっていました。P11以降に書いてあったのですね。

 助かりました。すみません。

(無題) 削除/引用
No.508-2 - 2011/06/10 (金) 06:06:49 - ポスドク
ちょっとのぞいてしまいましたので、もし役にたてば。
BACを使った事が無く、勘ですが、このあたりはどうでしょう。
www.med.osaka-u.ac.jp/pub/mr-envi/www/japanese/protocols/img/BAC_protocol_050507.pdf

BACのTransfer 削除/引用
No.508-1 - 2011/06/10 (金) 05:40:52 - ぽすどく
 BACが入っている大腸菌のStrainを変えたい(Transfer)のですが、概略を教えていただけますでしょうか。

 ある論文を読むと、Mini-prep後に、移したい先の種類の大腸菌にElectroporationする、と書いてあるのですが、BACでそのようなことが可能なのでしょうか。(プラスミドではもちろん簡単なのですが)

 ご存知の方がいましたら、教えていただければ幸いです。よろしくお願いいたします。

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