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「ブアン液は免疫染色に向かない」は本当?
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No.483-TOPIC - 2011/06/04 (土) 21:46:56 -
nami
ブアン液は組織浸透性・固定作用が強力なため、
組織観察に有用かと思われます。
しかし、
「タンパク質の変性作用が強いので、
抗体でタンパク質を検出する免疫染色には向かない」
という記述をある方のブログでお見かけしました。
シトコラン酸処理により回復可能だそうですが、
免疫染色にブアン液を使う場合、
必ず回復処理が必要なのでしょうか?
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No.483-3 - 2011/06/06 (月) 14:31:36 - ぽすどく
(あいまいな表現ですが)弱い抗原を検出したい場合、ブアンよりもPFAをまず試してみたいということはあるかと思います。他の方も言っている通り、相性の問題もあるでしょうね。PFAがだめで、ブアンなら染まるというケースもなくはないでしょうし。
別の角度からですが、ブアンで固定すると、ピクリン酸が蛍光を持っているので、蛍光染色のときに青と緑のチャンネルは使いにくくなります。(赤は問題ないです)
(無題)
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No.483-2 - 2011/06/06 (月) 08:46:30 - ~
>必ず回復処理が必要なのでしょうか?
回復処理をしないでやっている人もいたので”必ず”ではありません。
貴方の対象とするたんぱく質と抗体の組み合わせ次第でしょう。
「ブアン液は免疫染色に向かない」は本当?
削除/引用
No.483-1 - 2011/06/04 (土) 21:46:56 -
nami
ブアン液は組織浸透性・固定作用が強力なため、
組織観察に有用かと思われます。
しかし、
「タンパク質の変性作用が強いので、
抗体でタンパク質を検出する免疫染色には向かない」
という記述をある方のブログでお見かけしました。
シトコラン酸処理により回復可能だそうですが、
免疫染色にブアン液を使う場合、
必ず回復処理が必要なのでしょうか?
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