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(無題) 削除/引用 No.476-6 - 2011/06/02 (木) 16:30:32 - ~ 最近のプレートリーダーであれば、丸底対応などと書かれているものがありますよね。 対応さえしていれば、リーダーについて問題は起きないでしょう。 キットの推奨プロトコルだと前培養や呈色反応でウェル内で細胞を生かしておく必要があります。 丸底で細胞培養用プレートは無いと思いますので、浮遊系の細胞を扱うことになりますよね。 浮遊系の細胞が中央に集まって酸欠、栄養不足にならないように振盪することができれば、培養部分にも問題は生じないと思います。

お礼 削除/引用 No.476-5 - 2011/06/02 (木) 12:49:47 - Uzoko ありがとうございます。 やはり丸底プレートの測定はプレートリーダーには厳しいようですね。 cell counting kitのプロトコールにはただ96wellプレートとしか記載がないので、どうしようかと思っていました。 Hiroさんの言われた論文を見てみます。また、おおさんの言われるように同じサンプルで、同じプレート内のwell間の比較とU底と平底のプレート間の比較を行えば、はっきりすると思いました。

(無題) 削除/引用 No.476-4 - 2011/06/02 (木) 12:36:54 - おお 小出しですいません。いちど空のプレートとか何か一定の濃度のものを測ってみたらどうですか。 そうですねふらっとでブランクとって。各ウェルでどれくらいぶれるか検討つくと思いますが。

(無題) 削除/引用 No.476-3 - 2011/06/02 (木) 12:34:20 - おお 丸底は可也ぶれそうな気がしますので使ったことはありません。 光を垂直方向に当ててどの程度光が弱くなっているかをはかるようになっています。

古いペ^パーですが 削除/引用 No.476-2 - 2011/06/02 (木) 12:32:45 - Hiro 千葉衛研報告、第１３号、17-20、1989年にELISA法による抗体測定に用いるマイクロプレートの種類の比較検討という論文があり、Uとフラットを比較しています。 よかったら読んでみてはいかがでしょうか? プレートリーダーによっては各メーカーのプレートがあらかじめプリセットされていることもあるので、ウェル送りと光軸がプレートによって違うように思われます。 とくにUボトムだと、中央からずれれば測定する溶液の厚みが変わるので吸光度測定値がずれるように思われます。 どれくらいの精度でプレートリーダーがウェル送りを制御しているのかは不勉強でわかりません。 キットの推奨プロトコールではプレート指定はありませんか?

丸底96wellプレートで吸光度測定 削除/引用 No.476-1 - 2011/06/02 (木) 11:57:04 - Uzoko 教えてください。 cell couting kit-8という細胞増殖を測定する試薬があります。 これを使って吸光度を測定する際、96wellプレートの平底と丸底（Ｕ底）で値が違うのでしょうか？というか丸底で測定しても大丈夫でしょうか？プレートリーダーの原理がよくわかっていないのですが、光をプレートに当てて、透過した光を測定するのであれば、丸底だと屈折したりして値がおかしくなったりしますか？あほな質問ですみません。よろしくお願いします。

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