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SDS-PAGEのサンプル調整 トピック削除
No.388-TOPIC - 2011/05/12 (木) 16:17:06 - かーくん
SDS−PAGEをする際に、タンパク質のサンプルにサンプルバッファーを入れてボイルした後に急速冷却をしている人としていない人がいるのですが、これは必要な工程なのですか。またどのような意味があるのですか。教えてください。
　
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No.388-6 - 2011/05/14 (土) 09:19:51 - B
急速冷却については、原理的な事を考えると、はたして科学的な根拠があるのかかなり？です。それにSDSはいつまでも低温にさらしていると析出してくるしかえってどんなもんかと。液量も数十μlないし100μlでしょうから、別にその辺にほっといてもすぐに常温くらいには戻るでしょうし。

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No.388-5 - 2011/05/13 (金) 00:32:34 - Boston-Pullman
SDSで立体構造が崩れます。もしプロテアーゼが失活していなかったらゆっくり冷えていく過程でたやすく分解されます。インヒビターが手に入りにくかった時代からの名残かも知れません。

細心の注意を払うという意味で冷やすことは重要だと思います。

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No.388-4 - 2011/05/12 (木) 21:13:43 - qq
うまくすれば、混ざっているDNAが一本鎖になって、サンプルの粘度を落とせるかも、と思って、急速冷却することもありますが、効果的だった記憶はございません。

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No.388-3 - 2011/05/12 (木) 19:26:31 - モモ
急速冷却すると早く次の実験に進むことができます。
しかし、冷やしすぎるとSDSが析出して再溶解に余計に時間がかかります。

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No.388-2 - 2011/05/12 (木) 17:02:44 - ぺこ
別に必要ないと思います。

SDS-PAGEのサンプル調整 削除/引用
No.388-1 - 2011/05/12 (木) 16:17:06 - かーくん
SDS−PAGEをする際に、タンパク質のサンプルにサンプルバッファーを入れてボイルした後に急速冷却をしている人としていない人がいるのですが、これは必要な工程なのですか。またどのような意味があるのですか。教えてください。
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