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接着系細胞の培養
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No.38-TOPIC - 2011/02/18 (金) 14:04:12 - kumi
接着系細胞の継代培養を行う際についてです。
トリプシン処理を施し、遠心でトリプシンを除き、培地で懸濁させたあとは新しいディッシュで培養させるほうが良いのでしょうか?
それとも、もとのディッシュに細胞懸濁液を添加し培養させて問題ないのでしょうか?
よろしくお願いいたします。
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ありがとうございます
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No.38-6 - 2011/02/18 (金) 15:42:49 - kumi
ありがとうございます。
実際に試してみて問題なければ古いプレートも使用しようと思います。
ご解答くださいました皆様、本当にありがとうございました。
(無題)
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No.38-5 - 2011/02/18 (金) 15:29:19 - mAb
細胞によっては以下の手抜きプロトコルでやってます。
・トリプシンで剥がし、遠心せずに新しいプレート+培地で希釈
・使用済みプレートの残りをアスピレートし、新しい培地を加える
双方とも問題なく使えます(トランスフェクションに使用)。
当然ながら汎用的ではないので、細胞ごとに合ったプロトコルで継代しましょう。
(無題)
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No.38-4 - 2011/02/18 (金) 15:16:23 - Boston-Pullman
私はバックアップ用に古いプレートにも培地を加えています。
(無題)
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No.38-3 - 2011/02/18 (金) 14:30:47 - ~
細胞によっては同じディッシュに撒いても問題ありません。
問題ないことを確認した上であれば、同じディッシュで構わないと思います。
(何をもって問題が無いと判断するかが難しいですが、とりあえず増殖カーブが同じであれば継代目的に使っていいと思いますけど)
細胞によっては貼り付きが悪かったり、
回収し切れなかった細胞のためか増殖時にダマになりやすかったりしたこともあります。
(無題)
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No.38-2 - 2011/02/18 (金) 14:25:05 - 小児科医師(ゆとり教育)
もとのディッシュにトリプシンなどが残存している可能性はありませんか?細胞によっては微量のトリプシンが生存率や細胞形態に影響を与える可能性があるので、新しいディッシュを使うべきだと思います。
接着系細胞の培養
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No.38-1 - 2011/02/18 (金) 14:04:12 - kumi
接着系細胞の継代培養を行う際についてです。
トリプシン処理を施し、遠心でトリプシンを除き、培地で懸濁させたあとは新しいディッシュで培養させるほうが良いのでしょうか?
それとも、もとのディッシュに細胞懸濁液を添加し培養させて問題ないのでしょうか?
よろしくお願いいたします。
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