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(無題) 削除/引用 No.352-7 - 2011/05/11 (水) 14:17:07 - T.H. 低Ca濃度でないとケラチノサイトは分化しまうので、 in vitroのwound healing実験にも低Ca濃度の培地での培養が必要だと思います。 ケラチノサイトのmigrationにはEGFやEGF-like growth factor（HB-EGFやTGFα等）が必要だと思うので、何をみるかにもよるとは思うのですが、それらを加えるとうまくいくかもしれません。 細胞の密度はコンフルエントがいいと思います。 もしかしたら、この論文が参考になるかもしれません。 Dev Cell. 2003 Jun;4(6):865-77.

(無題) 削除/引用 No.352-6 - 2011/05/03 (火) 17:25:35 - aki >おお様 コンフレンシーの可能性も考えていたのですが、結局かわらず。。 ECMなども考慮してみるかmediumをかえるか試してみたいと思います

(無題) 削除/引用 No.352-5 - 2011/04/30 (土) 14:28:31 - おお ケラチノサイトようの低カルシウムのバイチ(増殖用)を使ってると思うのですが、それであればCa は加える必要はないと思えますが、、、、、 細胞によると思いますが、コンフルでぱんぱんにしてからスクラッチをいれるような場合もあるみたいなので、 そのへんはどうなんでしょうかね。

(無題) 削除/引用 No.352-4 - 2011/04/30 (土) 12:52:38 - aki ＞おお様、歩行者様 増殖はしております。増殖を止める為にはやはりCa添加をしてからでしょうか。 ケラチノサイトですとCa添加後に分化がはじまってしまうと思うのですが、 woundhealingの際にはそこまで気にする必要はないのでしょうか？ Ca添加後何時間後にスクラッチするといいかアドバイスを頂けると幸いです。 お手数をおかけしますが、宜しくお願いします。

(無題) 削除/引用 No.352-3 - 2011/04/29 (金) 23:46:55 - 歩行者 ケラチノサイトも動きますが、Ca2+がないせいでは？普通の培地でもガラス上で数時間でふさがりますよ。

(無題) 削除/引用 No.352-2 - 2011/04/29 (金) 14:05:44 - おお ケラチノサイトなのでそんなにマイグレーションする感じではないですよね、、、 増殖はしてますでしょうか。しているとしたら細胞が密になっていってスクラッチした部分には あまり移動しないということですよね。。。

マウスケラチノサイトのwound healingについて 削除/引用 No.352-1 - 2011/04/29 (金) 10:27:23 - aki はじめまして。 マウスケラチノサイトの初代培養にてwoundhealingをしようと試みています。 ケラチノサイトの回収、stockなどは問題なくできるのですが、 チップで傷をつけて24時間観察を行っても回復がほとんど見られません。 培地はCellntecのPCN培地を使用しております。 http://www.funakoshi.co.jp/node/13922 色々と条件をふったりしているのですが、なかなか上手くいかず。。 実際に実験を行ってらっしゃった方、わかる方がいらしゃったら是非アドバイスを頂けると幸いです。 当方のwound healingの条件としては、 ガラスdishにてコンフルになったのちチップで傷つけるのみです。 Caはほぼない状態のままに行っております。 是非宜しくお願いします。

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