御存じの方がいれば教えて頂ければと思います。
細胞の表面分子に対する抗体を使って、FACSやMACSで細胞を分離しているの
ですが、回収した細胞の表面には抗体がついたままの状態にあります。
通常ならばそのまま解析に使うのですが、当方の持ち合わせている抗体が、
表面分子に対する阻害活性を持っているため細胞の回収後に、抗体を剥離し
たいと考えております。
今のところ、pH2-4のバッファーで細胞を洗うなど試してみましたが、
抗体はpH2で剥がれるものの、生存率が極端に下がってしまいました。
そこで、回収した細胞をそのまま培養して表面分子がエンドサイトーシスされ、
分解されるまで待つことを考えております。
そこで質問なのですが、一般的に細胞表面分子の寿命はどのくらいなので
しょうか。もちろん、細胞種や分子の種類とかリサイクルされるのかによって
異なることは承知なのですが、Primaryの貴重な細胞のため時間をふるための
目安を知りたいと思っています。
もし類似の御経験のある方などがおられましたら、お教え願えればと思います。
宜しく御願い致します。 |
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