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(無題) 削除/引用 No.327-5 - 2011/04/29 (金) 10:51:49 - 通りすがり 一般的な話として、抗原認識に必要な部分以外があると非特異的な結合が増えるから２次抗体はなるべく余計な部分を除いて、Fab2、さらにFabでも親和性が十分ならもっと良い、とされてます。特にFcは確かに余計な結合をすることがありますね。ただFabにまですると親和性が落ちる場合も多いので、自作ではFab2にしてることが多いように思います。実感としては、whole IgGよりはFab2の方がバックが少ない印象はあります。

(無題) 削除/引用 No.327-4 - 2011/04/28 (木) 16:37:38 - BALB Fabなのは標識したい抗体同士を架橋しないようにするためでは？

少し興味を持ったので。 削除/引用 No.327-3 - 2011/04/28 (木) 07:00:11 - to 助言ではなく申し訳ございません。 Zenonでは何故Fabフラグメントを用いているのでしょうか？ 値段の問題か？IgGだと大きすぎて標識時に立体的に邪魔になるとかの問題があるのか？または全く別の問題なのか？何か理由があるんじゃないかと思うのですが、このあたりをどなたか販売元に問い合わせて頂けると参考になるかもしれませんね。誰かご存知でしたらお教えください。

(無題) 削除/引用 No.327-2 - 2011/04/27 (水) 15:07:12 - BALB 蛍光標識済みの一次抗体ではダメなのでしょうか？ ご自分で作成された抗体なら自分で標識するのはどうですか？

Zenonみたいな抗体標識方法 削除/引用 No.327-1 - 2011/04/22 (金) 23:38:04 - だるま InvitrogenのZenonのように、 一次抗体を二次抗体と予め反応させて、 余剰の二次抗体をＩｇＧで吸収させてた後に、染色に用いるという 方法の論文をご存知の方はいらっしゃいませんか？ (Ｚｅｎｏｎの場合、２次抗体はＦａｂフラグメントを用いていますが、 ＩｇＧを使った論文などがあると有難いです。 自分で検索してみたのですが、うまく見けられませんでしたので、 ご経験や知識をお持ちの方にご助言頂けたら、幸いです。) 実際に、２種類のマウスモノクローナル抗体で ＦＡＣＳ染色を行ってみたのですが、２次抗体によって うまく染め分けられる場合と、そうでない場合があるようなのですが、 どなたかご経験のある方はいらっしゃいませんか？ 良い２次抗体の情報などをお教え頂けたら、幸いです。 よろしくお願い致します。

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