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凍結切片
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No.237-TOPIC - 2011/04/01 (金) 10:38:08 -
てんどん
凍結切片作製初心者です。
マウスの脳を20μmで薄切し、HE染色をしたいと思ってます。
ヘマトキシリン、エオジンの染色時間はどのくらいになりますか?
どなたか教えてください。
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No.237-3 - 2011/04/03 (日) 12:22:44 - AA
普段マウス脳の染色をしていますが、凍結の場合予想以上にヘマトが染まります。
一般にヘマトが濃染するとエオジンが染まりにくくなるので、少しずつ様子を見ながら5分程度染めてみてください。
エオジンは脱水系列でかなり抜けやすいので気持ち強めに染めてもいいと思います。
私の場合、ヘマト5分(+色だし10分)・エオジン(10分)、です。
(無題)
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No.237-2 - 2011/04/02 (土) 05:02:11 - ABZO
脳は分かんないけどほかの組織はHは5分ー10分くらい、Eは5分以内くらいでやってる。Eは染めすぎになりやすい感じするので、短めにしてる。20μだと厚めだしね、微細な構造見るなら染め過ぎない方がいいかもね。
免疫染色したあとの対比染色ということならなら、HのみでEはしない。免疫染色に関連して、凍結だからたぶん賦活化はしてないとおもうけど、もししてるなら、Hは少し染まりにくくなるみたいなので1.5倍−2倍程度延長した方がいいかも。
凍結切片
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No.237-1 - 2011/04/01 (金) 10:38:08 -
てんどん
凍結切片作製初心者です。
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