バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「
新しいトピックを作る
」から書き込みをしてください。
質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。
トピック一覧
|
研究留学ネットに戻る
最新のフォーラム
|
このフォーラム
|
ひとつ前のフォーラム(readのみ)
このスレッドをはてなブックマークに追加
EDTA 免疫染色
トピック削除
No.1359-TOPIC - 2011/12/21 (水) 09:48:17 -
梅干し
前回EDTAにて質問させて頂いた梅干しです.
さっそく御教示頂いたプロトコールで染色をおこなったのですが,EDTA溶液に浸したビーカーにMWで賦活化をしたところ,スライドから標本が剥がれてしまいます.
MASコートスライドグラスを使用しており,クエン酸を使用した賦活化ではそのような事は起こりません.
同じような経験がある方で改善策等ありましたら.教えて頂ければ幸いです.
宜しくお願い致します.
-
このトピックにメッセージを投稿する
-
全
4
件 ( 1 〜 4 ) 前 | 次
1
/
1.
/
1
(無題)
削除/引用
No.1359-4 - 2011/12/23 (金) 17:45:08 - ABZO
クエン酸もキレート作用あるから、クエン酸で剥がれないなら、別に無理にEDTAでなくてもいいとおもうんだが。要はキレート剤でカルシウム取っぱらって、ホルマリンによる蛋白質間の架橋を不安定化することで加熱したとき切断しやすくするだけだし。クエン酸はカルシウムちゃんとキレートするよ。採血でいれると血全然固まらないし。
ふ活化のpHがアルカリのほうでやりたいとかなのかな?。だとクエン酸は合わないかな?
ふ活化で重要なのはとりあえずpHだな。弱酸性orアルカリ性どっちがいいかは抗原、抗体で違う。
(無題)
削除/引用
No.1359-3 - 2011/12/21 (水) 11:24:05 - 組織
EDTAとかpHが高い液は剥がれやすいです。
私の場合はMASより接着性の高いコートグラスを使えば大丈夫でした。
松浪硝子のフロンティアやプラチナを使ってます。価格はMASと同じです。
経験的には,EDTA>クエン酸緩衝液>DWの順に抗原賦活効果が高いと感じてます。
(無題)
削除/引用
No.1359-2 - 2011/12/21 (水) 10:07:07 - う
私もクエン酸以外でやるとはがれるので、
クエン酸が最も効果的(はがれないという意味でも)と
思っています。
EDTA 免疫染色
削除/引用
No.1359-1 - 2011/12/21 (水) 09:48:17 -
梅干し
前回EDTAにて質問させて頂いた梅干しです.
さっそく御教示頂いたプロトコールで染色をおこなったのですが,EDTA溶液に浸したビーカーにMWで賦活化をしたところ,スライドから標本が剥がれてしまいます.
MASコートスライドグラスを使用しており,クエン酸を使用した賦活化ではそのような事は起こりません.
同じような経験がある方で改善策等ありましたら.教えて頂ければ幸いです.
宜しくお願い致します.
全
4
件 ( 1 〜 4 ) 前 | 次
1
/
1.
/
1
パスワード
を入力してチェックした記事を
チェックした記事を
このトピックにメッセージを投稿する
名前
メール
アドレス非公開
タイトル
本文
設定
クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証
半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信
〔使い方〕
「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。