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(無題) 削除/引用 No.1347-3 - 2011/12/18 (日) 10:18:44 - aox >[Re:2] ごくりさんは書きました : > プロトコルが間違っていませんか？ > ｐＦＬＤで形質転換→株化→ｐＦＬＤで形質転換（２）のように > 早速のご回答ありがとうございます。 省略し過ぎた質問をしてしまい、申し訳ございません。 僕の場合、まずpPIC3.5ベクターを用いて形質転換し、ヒスチジン非要求性株をセレクションします。 目的遺伝子が組み込まれたのを確認した後、pＦＬＤベクターを用いて、別の目的遺伝子を得られた変異体に組み込もうと考えてます。 ちなみに、この2回目の組換えは、ゼオシンという抗生物質でセレクションしますが、なぜか、うまくいきません。

(無題) 削除/引用 No.1347-2 - 2011/12/18 (日) 06:30:55 - ごくり プロトコルが間違っていませんか？ ｐＦＬＤで形質転換→株化→ｐＦＬＤで形質転換（２）のように

ピキアについて 削除/引用 No.1347-1 - 2011/12/17 (土) 23:21:49 - aox 私は現在ピキアを用いていまして、ある遺伝子をpFLDベクターを用いてピキアのゲノムに組み込みたいと考えています。 この相同性組換えは2回目の組換えであり、すでに別の目的遺伝子を組み込んでます。 そこで質問ですが、今、行っている2回目の組換えがうまくいきません。 組換え方法は、プロトコルに従っていますがうまくいきません。 何かアドバイスをいただけると嬉しいです。よろしくお願いします。 　 組換え方法はエレクトロポレーションなので、うまくいかないときの対処方法などもご教授ください。

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