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(無題) 削除/引用 No.1289-4 - 2011/12/05 (月) 11:15:13 - mAb Blocking、洗浄効率というキーワードで想像してみて下さい。 ラボのプロトコルというのはあくまで暫定的であり、自分自身でいろいろ試して自分自身のプロコトルを作り上げることが重要になっていくと思います。 まずはラボプロトコルに従うのは必要ですが、ラボプロトコルが全てではありません。 といっても、一般的なウエスタンならば結果は一緒になることが多いです。抗体の親和性によっては大きな変更が必要となるケースもあります。

(無題) 削除/引用 No.1289-3 - 2011/12/03 (土) 17:08:18 - WB ウエスタンブロットの抗体反応液ですが、 各抗体に合わせて、組成も変わってくるものであって、 研究室に合わせて、組成が変わるものではありません。 PBSを使うのか、TBSを使うのか、各社から出ている抗体反応液を使うのか？ Tween-20を使うのか、TritonX-100を使うのか、その濃度は？ BSAを使うのか、スキムミルクを使うのか、血清を使うのか、ゼラチンを使うのか、はたまた何か別のものを使うのか、その濃度は？ いろいろ考えるポイントはありますね。

(無題) 削除/引用 No.1289-2 - 2011/12/03 (土) 16:03:53 - TS 「前の研究室」で添加していたスキムミルクと同じ目的でしょう。

ウエスタンの抗体反応時に用いるバッファーについて 削除/引用 No.1289-1 - 2011/12/03 (土) 16:01:49 - 抗体反応ちゃん いつも勉強させていただいております。 ウエスタンの抗体反応で用いるバッファーについて質問があります。 前の研究室では、 ・PBS ・0.1% triton X100 ・0.3%スキムミルク というようなバッファーを用いて、1次抗体、2次抗体と反応させていましたが、 今の研究室では ・PBS ・0.1% tween20 ・1% ゼラチン というバッファーで抗体処理を行ってるとことなのです。 実験書などでは、PBSTで反応させるなどが多いのですが、このゼラチンを加えるメリットというものは何なのでしょうか？ゼラチンを加えないと抗体処理がうまくいかないというような事はあるのでしょうか。 ご指導お願いします。

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